稻瘟病菌中病毒的初步研究.pdf

1、稻瘟病是造成水稻減產(chǎn)的重要病害之一，對稻瘟病的防治是一個(gè)世界性的難題，目前稻瘟病的防治措施主要有栽培抗病品種以及化學(xué)藥劑的使用。真菌病毒是專指能夠在真菌細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制和繁殖的一類病毒，目前已證實(shí)可以作為真菌性病害的生物防治資源。
　　本實(shí)驗(yàn)從湖北省宜昌市發(fā)病的水稻葉片上采用單孢分離的方法獲得純化培養(yǎng)的稻瘟病菌菌株YC13。菌株YC13攜帶7條dsRNA片段，其中片段F1與Magnaportheoryzae virus2(MoV2)

2、的Coat Protein(CP)和RNA-dependent RNA polymerase(RdRp)的氨基酸序列均具有99％的同源性，確定為MoV2的基因組;片段F4、F5序列與雙分病毒Magnaporthe oryzae partitivirus virus1(MoPV1)的RdRp和CP的氨基酸序列分別具有97％和99％的同源性，確定片段F4、F5為MoPV1的基因組。MoPV1的基因組含有2條dsRNA: dsRNA1編碼Rd

3、Rp，dsRNA2編碼CP。根據(jù)MoPV1的RdRp編碼的氨基酸序列將MoPV1歸屬于雙分病毒科（Partitiviridae）Gammapartitivirus屬，但并沒有相關(guān)生物學(xué)特性的研究。通過病毒粒子轉(zhuǎn)染，將MoPV1轉(zhuǎn)到稻瘟病菌菌株RB11。與菌株RB11相比，帶毒菌株RB11T25的分生孢子產(chǎn)生量顯著減少，并且對大麥活體葉片的致病性也有所降低，但其他生物學(xué)特均無明顯的差異。本研究在稻瘟病菌中發(fā)現(xiàn)了病毒MoPV1，該病毒能夠使

4、稻瘟病菌致病力下降，為稻瘟病的防治提供了潛在的病毒資源。
　　在2015年，采集田間發(fā)生稻瘟病的水稻葉片，并采用單孢分離的方法獲得純化培養(yǎng)的稻瘟病菌菌株171株，提取其總RNA進(jìn)行宏轉(zhuǎn)錄組測序，分析并鑒定其中的病毒資源。從171個(gè)稻瘟病菌菌株中測序數(shù)據(jù)中分析出66條類似病毒的基因序列，經(jīng)過RT-PCR驗(yàn)證最終確定22條病毒序列，其中12個(gè)+ssRNA病毒，3個(gè)-ssRNA病毒，7個(gè)dsRNA病毒，根據(jù)病毒RdRp序列編碼的蛋白構(gòu)建