涼潤通絡方防治糖尿病胃腸功能障礙干預研究.pdf

1、目的：糖尿病(diabetesmellitusDM)為常見病，發(fā)病率逐年增高。糖尿病胃腸動力障礙是糖尿病常見的并發(fā)癥，可累及全胃腸道。 目前西醫(yī)采用胃腸動力藥如西沙必利、嗎叮啉、紅霉素等治療本病，近期療效顯著，但停藥易復發(fā)，且長期服用副作用較大。 根據中醫(yī)學對“消渴”的傳統(tǒng)認識和現代研究成果，我們制定了“涼潤通絡”方劑，用于臨床，療效很好，為明確該方的改善糖尿病胃腸功能障礙的療效和機制，采用STZ注射制作了糖尿病大鼠模型

2、，通過對胃排空和小腸傳輸功能的檢測，證實了其對糖尿病大鼠的胃腸運動功能的改善； 方法：實驗一糖尿病大鼠胃腸功能障礙模型的復制40只清潔級Wistar雄性大鼠，體重180～220g，將大鼠隨機分為4組，10只作為正常對照組(N組)，30只為糖尿病模型。糖尿病模型組分為Ⅰ組(飼養(yǎng)6周)、Ⅱ組(飼養(yǎng)12周)、Ⅲ組(飼養(yǎng)18周)，每組各10只。 實驗二涼潤通絡方對糖尿病大鼠胃腸運動功能障礙影響的實驗研究40只清潔級Wistar雄

3、性大鼠，體重180～220g，隨機分為：A組(模型空白對照組)、B組(涼潤通絡治療組)、C組(西沙比利治療組)、正常空白對照組(N組)。每組各10只。糖尿病模型制備同第一部分。模型成功后，不予降糖藥控制血糖。飼養(yǎng)6周后，給予藥物灌胃，(1)涼潤通絡中藥組成及制作：生地20克、花粉20克、麥冬15克、烏梅6克、百合10克、白芍10克、木瓜10克、生石膏20克、當歸10克、川芎10克、蒲黃10克、靈脂10克、元胡10克、荔枝核15克、黃連6

4、克、栝蔞12克、半夏10克、女貞子15克、旱蓮草15克、枳實10克、蘆薈0.3克。本院制劑室制成煎劑。1ml/100g，1次/日。(2)西沙比利為浙江京新制藥有限公司生產，5mg/片，1mg/Kg，1次/日。治療6周后，觀察胃內殘留率、小腸推進率。 第二部分涼潤通絡方對糖尿病大鼠胃腸MOT、CCK、SS的影響40只清潔級Wistar雄性大鼠，體重180～220g，造模、分組、喂藥同第一部分實驗二。停藥禁食24小時后，股動脈取血，

5、置于抗凝管中混勻，4℃離心，取血漿； 第三部分涼潤通絡方對糖尿病大鼠胃粘膜微循環(huán)及微血管超微結構的影響32只清潔級Wjstar雄性大鼠，體重180～220g，造模、分組、喂藥同第一部分實驗二。 第四部分涼潤通絡方對糖尿病大鼠胃竇NO、NOS含量及eNOSmRNA表達的影響32只清潔級Wistar雄性大鼠，體重180～220g，造模、分組、喂藥同第一部分實驗二。 第五部分涼潤通絡方對糖尿病胃輕癱患者血清胃泌素及體表

6、胃電圖的影響2002年4月至2004年12月選擇本院門診和住院2型DM患者58例，其中門診35例，住院23例。 結果：第一部分涼潤通絡方對糖尿病大鼠胃腸運動功能的影響實驗一糖尿病胃腸功能障礙模型的復制1.與正常空白組血糖比較(6.43±1.27)，糖尿病6W、12W、18W模型組(22.04±5.06、23.16±5.48、22.78±6.02)明顯增高(P＜0.01)。 2.與正?？瞻捉M體重比較(215.55±13.5

7、1、231.5±16.05、260.74±21.38); 3.與正?？瞻捉M攝食量比較(14.64±3.02、14.98±2.99、15.57±3.14、15.86±3.40)，糖尿病模型組1W時(19.79±4.81)明顯增加(P＜0.01)； 4.胃排空比較：與正?？瞻捉M比較(13.2±9.4)，糖尿病6W組(14.1±10.3)胃內殘留率增加， 5.小腸推進率比較：與正常空白組比較(66.7±9.1)，糖尿病

8、6W組小腸推進率下降(58.8±8.9)，但無明顯差異(P＞0.05)； 6.血糖與胃排空呈直線正相關(γ=0.61)，P＜0.01。血糖與小腸推進率呈直線負相關(γ=-0.67)，P＜0.01。 實驗二涼潤通絡方對糖尿病大鼠胃腸運動功能障礙影響的實驗研究胃排空比較：與正?？瞻讓φ战M(13.2±9.4)比較，糖尿病模型組、中藥組、西藥組胃內殘留率(45.0±8.1、25.4±8.1、26.1±11.2)明顯增多(P＜0.

9、01)；與糖尿病模型組比較，糖尿病中藥組、西藥組胃內殘留率明顯減少(P＜0.05)；糖尿病兩個治療組比較，胃內殘留率無明顯變化(P＞0.05)。 小腸推進率比較：與正常空白對照組(66.7±9.1)比較，糖尿病模型組、中藥組、西藥組小腸推進率(34.6±6.6、48.9±7.2、46.8±8.1)明顯減少(P＜0.01)；與糖尿病模型組比較，糖尿病兩個治療組小腸推進率明顯增加(P＜0.05)；糖尿病兩個治療組小腸推進率比較無明顯

10、變化(P＞0.05)。 第二部分涼潤通絡方對糖尿病大鼠胃腸MOT、CCK、SS的影響1各組大鼠血漿和組織中MOT含量的變化與正常空白組血漿和組織的MOT含量(26.23±5.61、234.00±84.50)比較， 2各組大鼠血漿和組織中CCK含量的變化與正?？瞻捉M血漿和組織的CCK含量(2.52±0.64、137.19±24.50)比較，糖尿病模型組(4.35±0.42、238.51±30.71)、中藥組(3.48±0.

11、86、168.97±28.93)、西藥組(4.74±0.75、240.22±29.25)明顯升高(P＜0.01，P＜0.05)；與模型組比較，中藥組CCK含量明顯下降(P＜0.05)，西藥組CCK含量無明顯變化(P＞0.05)； 3各組大鼠血漿和組織中SS含量的變化與正?？瞻捉M血漿和組織SS含量(27.05±6.23、325.50±69.53)比較，糖尿病模型組(11.63±3.41、547.12±84.50)、中藥組(19.2

12、7±4.66、431.43±72.38)、西藥組(12.87±3.94、549.35±88.14)血漿SS含量明顯下降，組織SS含量明顯升高(P＜0.01，P＜0.05)；與模型組比較，中藥組血漿SS含量明顯升高，組織SS含量明顯下降(P＜0.05)，西藥組血漿和組織SS含量無明顯變化(P＞0.05)。 4小腸MOT免疫組化染色結果(1)形態(tài)學觀察免疫反應陽性的Mo細胞，胞漿內有藍色反應物，胞核為陰性。主要分布于十二指腸腺上皮層

13、及絨毛基底部上皮層，切面呈圓形、橢圓形、梭形、三角形等。(2)光鏡下Mo細胞測定與正?？瞻捉MMo細胞數(43.2±4.7)、強陽性細胞率(26.3±3.8)比較，糖尿病模型組Mo細胞數(26.8±6.3)顯著下降，強陽性細胞率(33.8±3.5)則增多(P＜0.01)；中藥組和西藥組Mo細胞數(39.0±6.4、41.0±5.0)、強陽性細胞率(24.8±3.6、25.5±4.4)均無顯著差異(P＞0.05)；與模型組比較，中藥組和西藥

14、組Mo細胞數顯著增多，強陽性細胞率顯著減少，(P＜0.01)； 5小腸CCK免疫組化染色結果(1)形態(tài)學觀察免疫反應陽性的Ⅰ細胞，胞漿內有藍色反應物，胞核為陰性。(2)Ⅰ細胞測定與正?？瞻捉MⅠ細胞數(215.2±15.2)、強陽性細胞率(131.8±8.3)比較， 6胃竇SS免疫組化染色結果(1)形態(tài)學觀察免疫反應陽性的D細胞，胞漿內有藍色反應物，胞核為陰性，主要分布于胃竇粘膜的中、下層，偶見于上層。 第三部分涼

15、潤通絡方對糖尿病大鼠胃粘膜微循環(huán)及微血管超微結構的影響1各組大鼠GMBF的變化與正?？瞻捉MGMBF(159.22±50.52)比較; 2各組大鼠血液流變學變化比較本實驗觀察了全血粘度、血漿粘度、紅細胞壓積、纖維蛋白原、紅細胞聚集指數五項血流變指標。 3各組大鼠胃粘膜微血管超微結構變化糖尿病模型組微血管基底膜均有不同程度增厚。 第四部分涼潤通絡方對糖尿病大鼠胃竇NO、NOS含量及eNOSmRNA表達的影響1各組大鼠

16、血清與組織NO含量比較與正?？瞻捉M血與組織NO含量(77.46±16.84、4.20±0.65)比較; 2各組大鼠血清與組織NOS含量比較與正?？瞻捉M血與組織NOS含量(3.65±0.38、6.99±0.88)比較; 3各組大鼠胃竇eNOSmRNA原位雜交檢測結果比較與正?？瞻捉M胃竇組織的eNOSmRNA比較，模型組、中藥組、西藥組表達增強(P＜0.01)； 4各組大鼠胃竇eNOSmRNART-PCR檢測結果與正

17、?？瞻捉M(0.1383±0.0566)比較; 第五部分涼潤通絡方對糖尿病胃輕癱患者血清胃泌素及體表胃電圖的影響結果顯示： 結論：對實驗所得結果進行系統(tǒng)分析后，可以得出以下結論：112周時糖尿病大鼠出現糖尿病胃腸功能障礙，胃排空及小腸傳輸功能均下降。血糖與胃排空呈直線負相關，與小腸推進率呈直線負相關。涼潤通絡方能夠改善糖尿病大鼠的胃排空和小腸傳輸功能，作用與西沙必利相當。 212周時糖尿病大鼠出現胃腸激素的紊亂，涼