PCNA、EGFR在2型糖尿病雄性SD大鼠睪丸組織的表達及相關因素分析.pdf

1、目的:近年來,由于生活水平的提高、飲食結構的改變、日趨緊張的生活節(jié)奏以及少動的生活方式等諸多因素的影響,全球糖尿病發(fā)病率增長迅速,成為繼心腦血管疾病、腫瘤之后又一嚴重危害大眾健康的慢性非傳染性疾病。生殖系統(tǒng)功能障礙是糖尿病并發(fā)癥之一,其發(fā)病率是非糖尿病病人的5～10倍,給患者的身心健康帶來了嚴重的壓力和困擾,近年來越來越受到重視。本研究主要通過建立2型糖尿病模型大鼠探討兩種影響生殖功能的因子,PCNA及EGFR在正常及不同病程糖尿病SD

2、大鼠睪丸功能的影響,并觀察睪丸形態(tài),為T2DM雄性生殖功能障礙的發(fā)病機制和治療提供一定的理論依據。
　　 方法:健康雄性SD大鼠30只,每日均自由飲水、進食飼料,隨機分為3組:正常組(N組,10只),每日予生理鹽水灌胃作對照；T2DM4周組(A組,10只)和T2DM8周組(B組,10只),每日予脂肪乳(高糖高脂飲食)灌胃。第7周末測定血清胰島素,并進行比較；次日清晨稱取動物體重。實驗組空腹予小劑量鏈脲佐菌素(STZ,Sigma公

3、司)按30mg/kg體重尾靜脈注射誘導2型糖尿病模型；而正常對照組大鼠予等量無菌枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液尾靜脈注射。以FPG≥16.7mmol/L為診斷糖尿病大鼠的標準,實驗組大鼠于第8周造模成功,成模后A組、B組繼續(xù)維持高糖高脂飲食,A組于T2DM4周后處死,B組于T2DM8周后即實驗結束時處死；N組與A組同期處死。斷尾取血,并用羅氏血糖儀測定血糖值；腹主動脈取血離心后血清待測胰島素、糖化血清蛋白、睪酮、血脂等。放免法檢測血清胰島素；比

4、色法檢測糖化血清蛋白；化學發(fā)光法測定血清睪酮；取雙側睪丸待免疫組化SABC法檢測睪丸組織EGFR、PCNA表達,并行相關因素分析。數據采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件處理。
　　 結果:A,B組大鼠空腹血糖水平、胰島素抵抗指數高于N組大鼠,且差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05,P<0.05)；糖化血清蛋白隨病程升高,三組間都有統(tǒng)計學意義差異(P<0.05,P<0.05,P<0.05)；B組大鼠的胰島素水平較N組及A組大鼠有統(tǒng)計學意義升高

5、(分別為P=0.001,P=0.036);A,B組大鼠的體重與N組大鼠相比,有統(tǒng)計學意義降低(P<0.05)； A、B組大鼠睪丸重量、血清睪酮較N組都有統(tǒng)計學意義下降(P<0.05,P<0.05)。睪丸免疫組化顯示PCNA免疫陽性物呈棕黃色顆粒,主要是精原細胞和初級精母細胞,支持細胞也有著色；EGFR在精母細胞、精子細胞、間質細胞和支持細胞均呈陽性反應。A、B組大鼠睪丸PCNA和EGFR陽性率明顯低于N組大鼠(P<0.05,P<0.05

6、),PCNA和EGFR與血糖呈負相關,相關系數r分別為-0.665(P<0.05),-0.540(P=0.002)；PCNA、EGFR與睪丸重量呈正相關,相關系數分別為r=0.496(P=0.009),r=0.454(P=0.012)；PCNA、EGFR與血清睪酮水平呈正相關,相關系數分別是r=0.574(P=0.001),r=0.428(P=0.018)。
　　 結論:(1)脂肪乳灌胃(高糖高脂飲食)7周加小劑量一次尾靜脈注射

7、STZ可以成功誘導SD大鼠的2型糖尿病模型,方法可靠,可全部成模；(2)PCNA及EGFR在糖尿病雄性SD大鼠睪丸組織的表達較正常組雄性SD大鼠睪丸組織表達顯著減少;(3)糖尿病雄性SD大鼠睪丸的重量及血清睪酮的水平較正常組大鼠是顯著減少；(4)SD雄性大鼠睪丸組織PCNA及EGFR表達與血糖是呈負相關的；(5)大鼠睪丸PCNA、EGFR表達與睪丸重量及血清睪酮水平呈正相關?？傊?PCNA及EGFR在糖尿病雄性SD大鼠睪丸表達減少,通過