丙烯酰胺對大鼠睪丸組織PCNA、EGFR蛋白表達(dá)的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　研究丙烯酰胺（acrylamide，AA）對大鼠睪丸組織的亞急性毒性作用，及其對增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）和表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)蛋白表達(dá)的影響，初步探討丙烯酰胺生殖毒性的可能作用機(jī)制。
　　方法：
　　將32只5～6周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組，每組8只，分別為空白

2、對照組，4 mg/kg、12 mg/kg和36 mg/kg劑量丙烯酰胺染毒組，連續(xù)灌胃染毒30天。處理結(jié)束后，心臟取血，化學(xué)發(fā)光法檢測血清中睪酮(testosterone，T)和雌二醇(estradiol，E2)的含量，取雙側(cè)睪丸組織，HE染色觀察睪丸組織病理學(xué)變化，TUNEL檢測睪丸細(xì)胞凋亡情況，RT-PCR檢測睪丸組織PCNA、EGFR mRNA的表達(dá)，免疫組化和Westernblot檢測睪丸組織PCNA、EGFR蛋白的表達(dá)。

3、>　　結(jié)果：
　　與對照組比較，12、36 mg/kg染毒組大鼠體重明顯下降(P＜0.05)，36 mg/kg染毒組大鼠睪丸臟器系數(shù)升高(P＜0.05); HE染色顯示，12、36 mg/kg染毒組大鼠睪丸組織出現(xiàn)了明顯的病理形態(tài)學(xué)改變，具體表現(xiàn)為生精細(xì)胞減少、生精上皮萎縮、管腔出現(xiàn)空泡等;TUNEL顯示12、36 mg/kg染毒組睪丸凋亡細(xì)胞顯著增多（P＜0.05）;化學(xué)發(fā)光法顯示，各染毒組大鼠血清T濃度呈劑量依賴型下降(P＜0

4、.05)，12、36 mg/kg染毒組大鼠血清E2濃度下降(P＜0.05);RT-PCR顯示，12、36 mg/kg染毒組大鼠睪丸組織PCNA和EGFR的mRNA表達(dá)均明顯降低(P＜0.05);免疫組化和Western blot顯示，12、36 mg/kg染毒組大鼠睪丸組織PCNA的蛋白表達(dá)明顯降低(P＜0.05)，各染毒組大鼠睪丸組織EGFR的蛋白表達(dá)明顯降低(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　一定劑量