地塞米松刺激THP-1細(xì)胞釋放具有促凝血功能的組織因子陽(yáng)性膜微粒.pdf

1、研究目的:
　　 探究激素刺激下，單核細(xì)胞所釋放的膜微粒和組織因子(TF)陽(yáng)性膜微粒的數(shù)量、促凝血功能。組織因子的表達(dá)和作用，以及激素對(duì)單核細(xì)胞內(nèi)組織因子表達(dá)的影響。內(nèi)毒素對(duì)單核細(xì)胞的作用是否能被激素促進(jìn)或者抑制。
　　 研究方法:
　　 選用人單核細(xì)胞腫瘤細(xì)胞系THP-1為研究對(duì)象。用地塞米松0.1mM、0.01mM、0.001mM三種不同濃度分別刺激4h、12h、24h后，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)上清液中組織因子陽(yáng)性

2、膜微粒和總膜微粒的數(shù)量，以及TF陽(yáng)性膜微粒所占比例。用一期法凝血時(shí)間測(cè)定細(xì)胞上清液的促凝血活性。用CD14抗體捕獲膜微粒，測(cè)定膜微粒相關(guān)的組織因子活性。用熒光實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)定細(xì)胞中組織因子的mRNA水平。
　　 研究結(jié)果:
　　 除4h-0.001mM組外，激素刺激組釋放的TF陽(yáng)性膜微粒數(shù)量比基礎(chǔ)值高出1.5-3倍，總膜微粒高出基礎(chǔ)值1.3-2.5倍。地塞米松的劑量與TF陽(yáng)性膜微粒數(shù)量正相關(guān)(r＝0.673，p<0.0

3、01)，與總膜微粒數(shù)量正相關(guān)(r=0.804，p=0.001)。激素對(duì)LPS刺激THP-1細(xì)胞釋放TF陽(yáng)性膜微粒沒(méi)有促進(jìn)作用。地塞米松刺激THP-1細(xì)胞后釋放的TF陽(yáng)性膜微粒表面的TF具有活性。
　　 地塞米松刺激THP-1細(xì)胞的上清液的凝血時(shí)間比陰性對(duì)照縮短(p<0.05)，4h組和24h組的凝血時(shí)間與同一樣本的上清液中TF陽(yáng)性膜微粒數(shù)量負(fù)相關(guān)(4h r=-0.762 p=0.028；12h r＝-0.833 p=0.010)