糖尿病大鼠慢性難愈合創(chuàng)面模型的制備.pdf

1、目前，糖尿病的發(fā)病人數(shù)逐年增多，已成為世界上繼腫瘤、心血管病后的第三位嚴重影響患者生活質量的慢性疾病。在糖尿病患者的發(fā)病過程中，有30％的患者會發(fā)生皮膚感染，而且經常反復發(fā)作，持久不愈?；继悄虿〉娜耍坏┌l(fā)生皮膚感染后，糖尿病的癥狀就會加重，而且不容易控制，如果治療不及時就會向縱深發(fā)展，甚至最后會導致截肢，嚴重地影響患者的生活質量。據(jù)統(tǒng)計由于糖尿病潰瘍所導致的截肢在非創(chuàng)傷性截肢患者中達到50％以上，因此糖尿病患者發(fā)生皮膚潰瘍越來越引起醫(yī)

2、務工作者及研究人員的重視。為了研究糖尿病患者慢性難愈合創(chuàng)面的發(fā)病機制，尋找治療糖尿病慢性難愈合創(chuàng)面的有效方法，本實驗首先復制了糖尿病大鼠，然后在實驗性糖尿病大鼠背部造成方形(2cm×2cm)的創(chuàng)面，并觀察創(chuàng)面的愈合情況。
　　本實驗的目的是建立糖尿病慢性難愈合創(chuàng)面，由于其發(fā)病過程、愈合過程及組織病理學的改變與臨床糖尿病潰瘍相似，這一模型為探討糖尿病慢性難愈合創(chuàng)面的發(fā)生機制與臨床藥物治療研究提供一理想的動物模型。
　　在本實驗

3、中，先通過腹腔注射鏈尿佐菌素(Streptozotocin，STZ)建立糖尿病大鼠模型，在給藥后72h檢測大鼠血糖，同時觀察其體重、飲水量、飲食量的變化，在成模60天時，將大鼠處死，取胰腺做石蠟切片，進行形態(tài)觀察。結果顯示實驗組大鼠在給藥后第3天，非空腹血糖明顯高于對照組而達到了成模標準:血糖值≥16.7mmol/L。大鼠的飲水量、飲食量也分別在給藥后的第7天明顯高于對照組，體重觀察結果表明在造模后的第30天，實驗組與對照組有了明顯的區(qū)

4、別。實驗組大鼠呈現(xiàn)出了糖尿病患者的典型的“三多一少”癥狀，直到建模后的60天，實驗組大鼠的血糖仍維持在成模標準之上。胰島形態(tài)觀察也顯示:對照組大鼠胰腺結構正常，胰島細胞數(shù)量多，胞漿飽滿，細胞輪廓規(guī)則整齊；實驗組大鼠胰島細胞數(shù)量減少，部分細胞退化萎縮，細胞輪廓不規(guī)則，排列紊亂，二者對比，實驗組大鼠的胰島細胞結構發(fā)生了較為明顯的病理改變。
　　本實驗依據(jù)此藥量和方法批量復制糖尿病大鼠，在糖尿病大鼠模型的基礎上，于大鼠的背部人工制作(2

5、×2cm)的方形創(chuàng)面，在創(chuàng)面部位接種金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌，同時觀察大鼠的創(chuàng)面愈合情況。結果顯示:實驗組大鼠在接菌后的第3-5天創(chuàng)面有淺黃色的膿性分泌物出現(xiàn)；而對照組創(chuàng)面較為干燥，兩組創(chuàng)面有比較明顯的區(qū)別。實驗組創(chuàng)面在前12天愈合速度比對照組明顯減慢，12天后有加快的趨勢，至接菌后的第30天，仍有2只大鼠有殘余創(chuàng)面；而接菌后的第17天，對照組創(chuàng)面已完全愈合，無殘余創(chuàng)面，兩組創(chuàng)面的愈合情況有非常明顯的區(qū)別。
　　一般來講，糖尿病大

6、鼠較難發(fā)生自發(fā)性潰瘍，且不易定量與標準化。根據(jù)以往經驗，在實驗性糖尿病動物的背部人工造成創(chuàng)傷，然后定量觀察大鼠在糖尿病狀態(tài)下傷口的愈合情況，這種創(chuàng)傷模型的特點是愈合50％創(chuàng)面面積的時間較對照組明顯延長，它不僅可再見糖尿病創(chuàng)面的組織病理學特征，而且還具有方法簡單，易于復制等特點，便于推廣應用。該模型可用于糖尿病狀態(tài)下慢性難愈合創(chuàng)面的發(fā)生機制與治療的研究，也可用于研究各種藥物對創(chuàng)面修復的影響。如果將該模型創(chuàng)面的成纖維細胞與表皮細胞進行培養(yǎng)，