脊髓爆震傷后神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化及藥物干預(yù)治療的初步研究.pdf

1、隨著世界軍事科學(xué)技術(shù)的變革和戰(zhàn)略戰(zhàn)術(shù)理論的轉(zhuǎn)變，具有多因素、多途徑、多處殺傷效應(yīng)的爆炸性武器在現(xiàn)代戰(zhàn)爭(zhēng)中應(yīng)用越來(lái)越廣。這就使得爆震傷在現(xiàn)代戰(zhàn)爭(zhēng)中所占的比重越來(lái)越大。在最近的幾場(chǎng)局部戰(zhàn)爭(zhēng)中，新型導(dǎo)彈和新型炸藥導(dǎo)致的各種爆震性損傷層出不窮；在平時(shí)的恐怖主義活動(dòng)和案件事故當(dāng)中，這類(lèi)損傷的發(fā)生率和致死率也是居高不下。因此，爆震性損傷已經(jīng)成為各個(gè)醫(yī)學(xué)學(xué)科研究的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。在戰(zhàn)時(shí)脊髓損傷當(dāng)中，脊髓爆震傷的發(fā)生率也越來(lái)越高，而且已經(jīng)成為野戰(zhàn)外科領(lǐng)域研

2、究的熱點(diǎn)和迫切需要解決的問(wèn)題。通過(guò)研究脊髓爆震傷的損傷機(jī)制和救治方案，將為這類(lèi)損傷的預(yù)防與診治提供重要的理論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)。
　　因此，本課題的主要目的是研究在現(xiàn)代戰(zhàn)爭(zhēng)條件下脊髓爆震傷后，脊髓的病理變化、細(xì)胞損傷機(jī)制，以及在野戰(zhàn)條件下進(jìn)行早期救治的最佳方案，為提高我軍戰(zhàn)斗力，降低傷殘率服務(wù)。
　　目的：
　　觀察不同爆炸距離下脊髓爆震傷(沖擊波損傷)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷拇篌w病理學(xué)改變，分析脊髓爆震傷的早期傷情變化及致傷因素；

3、觀察脊髓爆震傷后神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化，檢測(cè)二次損傷中凋亡現(xiàn)象是否在存在，并記錄凋亡細(xì)胞的時(shí)空分布特點(diǎn)；研究大劑量維生素C（VitC）＋β-七葉皂甙鈉（SA）聯(lián)合治療脊髓爆震傷的療效，并與目前的常規(guī)治療方法進(jìn)行對(duì)比，探索它們的應(yīng)用前景。
　　方法：
　　（1）15只家兔在背部損傷區(qū)備皮，麻醉后選擇1cm、2cm、3cm、3.5cm、4cm（n=3）五個(gè)爆炸距離，電控引爆，觀察動(dòng)物全身及脊髓的大體病理學(xué)損傷情況，分析致傷因素以及

4、早期損傷的變化情況；
　?。?）在4cm的爆震距離下，將96只家兔隨機(jī)分為空白對(duì)照組（n=16）和實(shí)驗(yàn)組（n=80）。其中空白對(duì)照組未爆震損傷。實(shí)驗(yàn)組電控引爆后，有4只動(dòng)物被排除出實(shí)驗(yàn)組。在剩余的動(dòng)物中，36只動(dòng)物分別于損傷后8h（n=6）、1d（n=6）、3d（n=6）、7d（n=6）、14d（n=6）和30d（n=6）取材，用于HE染色和TUNEL染色；20只動(dòng)物則分別于損傷后8h（n=5）、1d（n=5）、3d（n=5）和7

5、d（n=5）取材，用于透射電鏡檢測(cè)；20只動(dòng)物則分別于損傷后8h（n=5）、1d（n=5）、3d（n=5）和7d（n=5）取材，用于DNA電泳分析。各組取材之前均運(yùn)用Tarlov’s評(píng)分評(píng)估下肢的運(yùn)動(dòng)功能；
　?。?）在36只家兔中，除空白對(duì)照組（A組，n=6）未爆炸損傷外，其余家兔均在爆炸距離距為4cm的情況下，電擊引爆。然后將其隨機(jī)分到損傷對(duì)照組（B組，n=6）、地塞米松治療組（C組，n=6）、VitC治療組（D組，n=6）、

6、SA治療組（E組，n=6）和VitC+SA治療組（F組，n=6）共5組。各組均運(yùn)用Tarlov’s評(píng)分法評(píng)估動(dòng)物8h、1d、3d、7d和14d時(shí)的下肢運(yùn)動(dòng)功能，而且于損傷后14天統(tǒng)一取材，并應(yīng)用HE染色和TUNEL染色技術(shù)，檢測(cè)藥物對(duì)爆震損傷后脊髓的治療情況。
　　結(jié)果：
　?。?）隨著爆炸距離的延長(zhǎng)，脊髓爆震傷后動(dòng)物的傷情明顯減輕。而且動(dòng)物的個(gè)體差異對(duì)相同距離下脊髓爆震傷后的傷情也有比較明顯的影響。爆炸沖擊波是脊髓爆震傷的

7、主要致傷因素。其導(dǎo)致的肺臟等空腔臟器的嚴(yán)重?fù)p傷也是動(dòng)物死亡的主要原因。因此，在治療脊髓爆震傷的同時(shí)必須注重對(duì)肺臟等其他重要臟器的治療；
　?。?）對(duì)脊髓組織采用HE染色和TUNEL技術(shù)等方法觀察細(xì)胞的凋亡狀況，證實(shí)脊髓爆震傷后廣泛存在神經(jīng)細(xì)胞凋亡，而且發(fā)現(xiàn)爆震傷后神經(jīng)細(xì)胞的凋亡時(shí)空分布具有以下特征：
　?、贀p傷后在灰質(zhì)和白質(zhì)中均檢測(cè)到陽(yáng)性細(xì)胞，但是灰質(zhì)中的凋亡細(xì)胞特別少，而且多數(shù)為膠質(zhì)細(xì)胞，凋亡的神經(jīng)元細(xì)胞很少見(jiàn)，可能神經(jīng)元

8、多數(shù)都是以壞死的形式死亡的；
　?、谀z質(zhì)細(xì)胞在傷后很長(zhǎng)時(shí)期內(nèi)陸續(xù)通過(guò)凋亡的方式死亡，而神經(jīng)元的死亡則主要是以壞死為主，而且發(fā)生的時(shí)間較早；
　?、刍屹|(zhì)中的凋亡細(xì)胞在1d時(shí)達(dá)到高峰，但是同時(shí)期白質(zhì)中的凋亡細(xì)胞數(shù)目比灰質(zhì)中要多的多。而白質(zhì)中的凋亡細(xì)胞數(shù)目則在7d時(shí)達(dá)高峰，主要分布在白質(zhì)的周邊，以膠質(zhì)細(xì)胞為主。隨后凋亡細(xì)胞數(shù)明顯下降，但到14d時(shí)仍可見(jiàn)部分凋亡細(xì)胞；
　　④相鄰脊髓節(jié)段的陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)在7d時(shí)明顯比爆心節(jié)段多，

9、而且爆震傷后凋亡的波及范圍從上到下可達(dá)約4cm之多；
　?。?）實(shí)驗(yàn)證實(shí)脊髓爆震傷后早期單獨(dú)使用SA治療，可以有效的提高下肢運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)、保存前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的數(shù)目和降低凋亡細(xì)胞的數(shù)量，而且與激素治療組相比并沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；單獨(dú)大劑量VitC治療除可有效保護(hù)前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元外，并不能提高下肢的運(yùn)動(dòng)恢復(fù)和減少凋亡細(xì)胞的數(shù)目；而聯(lián)合使用大劑量VitC+SA治療效果較佳，與單獨(dú)應(yīng)用大劑量VitC、SA或激素治療相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。