人ICOS分子的表達與單克隆抗體的研制及其生物學功能的研究.pdf

1、該研究在國內率先采用基因工程技術克隆了全長的人ICOS基因和胞外段cDNA,構建了ICOS轉基因細胞,并在大腸桿菌中成功表達了具有生物學活性的ICOS可溶性重組蛋白,對其生物學功能作了初步探討.利用ICOS轉基因細胞作免疫原,成功獲得兩株鼠抗人ICOS單克隆抗體,并對其中一株的生物學特性作了鑒定.在此基礎上,分析了ICOS-GL50在DC成熟與體液免疫中的作用,并進一步研究了ICOS-GL50信號對多發(fā)性骨髓瘤細胞體內外生物學行為的作用

2、及其可能機制.一、人ICOS分子的表達及其生物學活性研究.綜合該研究結果:我們成功地在大腸桿菌中表達出ICOS重組蛋白,并構建了高表達膜型ICOS分子的轉基因細胞,對其生物學功能研究表明,ICOS轉基因細胞和重組蛋白均能直接并顯著地抑制惡性淋巴瘤Daudi的體外增殖,誘導其凋亡,故重組ICOS蛋白在惡性B細胞腫瘤的生物治療中可能具有潛在的運用價值.二、ICOS-GL50在DC成熟及T細胞依賴性B細胞產生抗體中的作用.綜上所述,ICOS信

3、號的激發(fā)可以上調不成熟的DC的CD40和CD83的表達,在低劑量CD40mAb的作用下,可以誘導產生成熟的DC.ICOS-GL50信號在調節(jié)T細胞依賴性B細胞應答中的起著重要作用.三、鼠抗人ICOS單克隆抗體的研制及生物學特性鑒定.研究表明:獲得一株穩(wěn)定分泌抗人ICOSmAb的雜交瘤細胞株(2C7),亞型分析2C7mAb的重鏈屬小鼠IgG1、輕鏈為k.2C7mAb與標準對照mAb識別的抗原位點不完全相同,能特異性識別活性T細胞表達的IC

4、OS分子.2C7mAb可以單獨促使CD4<'+>T細胞增殖,也可與CD28 mAb協(xié)同引起CD4<'+>T細胞進一步增殖,2C7mAb協(xié)同刺激可顯著上調T細胞對IL-10的分泌.四、ICOS-GL50信號轉導在多發(fā)性骨髓瘤生物學行為中的作用.綜合所述:抗人ICOS單抗2C7mAb能抑制表達ICOS分子的人多發(fā)性骨髓瘤細胞株XG1、XG2細胞的體外增殖,誘導其凋亡;ICOS重組蛋白能使XG2細胞上調趨化因子CSCR4、粘附分子CD54.I