兩株抗人CD40配體單克隆抗體的制備及其生物學(xué)功能研究.pdf

1、蘇州大學(xué)碩士學(xué)位論文兩株抗人CD40配體單克隆抗體的制備及其生物學(xué)功能研究姓名：樊一筍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：張學(xué)光2001.4.1摘要免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)。業(yè)已報(bào)道，運(yùn)用抗CD40L單克隆抗體阻斷CD40／CD40L，能有效地抑制特異性免疫應(yīng)答，減少特異性抗體和CTL的產(chǎn)生，在自身免疫、移植排斥、炎癥等病理免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。有報(bào)道，抗CD40L單克隆抗體在小鼠自發(fā)性。腎炎SNFl、小鼠糖尿病NOD、實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的膠原性關(guān)節(jié)

2、炎、實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎EAE等自身免疫病模型中，均能不同程度地減少自身抗體或自身反應(yīng)性T細(xì)胞的產(chǎn)生，緩解癥狀，延遲病程發(fā)展。同時(shí)，在皮膚、心臟、腎等小鼠移植模型中，運(yùn)用抗CD40L單克隆抗體能明顯延長(zhǎng)移植物的存活，為移植排斥的防止和移植耐受的誘導(dǎo)提供了新方法。該單抗在基礎(chǔ)及臨床免疫學(xué)中的應(yīng)用前景已受到廣泛關(guān)注。目前，世界上報(bào)道的阻斷型抗CD40L單抗僅三株，國(guó)內(nèi)尚未見有關(guān)報(bào)道。鑒此，阻斷型抗CD40L單抗的研制不僅具有重要理論研究

3、意義，而且還有潛在的、開發(fā)價(jià)值。，p本研究以高表達(dá)人CD40L分子的小鼠成纖維轉(zhuǎn)基因細(xì)胞為抗原，采用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)將免疫的小鼠脾臟細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞SP2／0融合，通過熒光標(biāo)記、競(jìng)爭(zhēng)抑制、細(xì)胞核型分析和免疫印跡等方發(fā)獲得并建立兩株識(shí)別不同抗原位點(diǎn)的鼠抗人CD40L單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株，分別命名為181、4F1。經(jīng)體外長(zhǎng)期傳代培養(yǎng)，液氮凍存半年以上反復(fù)復(fù)蘇良好，分泌特異性抗體性能穩(wěn)定。fCD40分子表達(dá)在一些非免疫細(xì)胞如血管內(nèi)