顱腦創(chuàng)傷后自身免疫與繼發(fā)性損害相關性研究.pdf

1、目的：研究重型顱腦創(chuàng)傷患者血清抗腦抗體變化趨勢；通過新西蘭大白兔腦皮層組織注射抗腦抗體并行注射點周圍組織細胞凋亡以及谷氨酸表達檢測，研究抗腦抗體對腦組織的損害作用；建立兔腦單側重型液壓沖擊創(chuàng)傷模型，通過給予免疫抑制治療，探討免疫抑制治療對于創(chuàng)傷后腦組織的保護作用。 方法：研究共分為三部分，第一部分，用ELISA法檢測49例顱腦創(chuàng)傷患者和47例健康人的血清抗腦抗體濃度。所有顱腦創(chuàng)傷患者分別于傷后第3天、7天、2周、3周、1個月、2

2、個月及6個月，9個月等時間點，采集空腹肘靜脈血4ml。分離血清，置-20℃保存。對照組樣本采集無時間限定。收齊標本后用ELISA法檢測抗腦抗體的濃度。第二部分，24只新西蘭大白兔隨機分為3組，抗腦抗體組、免疫抑制組和生理鹽水對照組，新西蘭大白兔大腦皮層微量注射抗腦抗體，對照組于相同部位注射等量生理鹽水，一個月后處死新西蘭大白兔，取注射點周圍皮層組織，用免疫組織化學方法，測定其谷氨酸表達，用脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法測定

3、其細胞凋亡情況。第三部分，24只新西蘭大白兔隨機分為3組，即創(chuàng)傷組、免疫抑制組、假手術組，建立兔腦單側重型液壓沖擊創(chuàng)傷模型，免疫抑制組隔日口服環(huán)孢素A50mg，收集創(chuàng)傷前2小時及創(chuàng)傷后3天、7天、14天、21天、28天、35天、42天、49天各時間點血清標本，用放射免疫法檢測血清抗腦抗體的濃度，所有新西蘭大白兔于傷后50天處死，取創(chuàng)傷周圍皮層組織，用免疫組織化學方法，測定其谷氨酸表達，用TUNEL法測定其細胞凋亡。 結果：健康人

4、群血清中有少量抗腦抗體存在，顱腦創(chuàng)傷組患者血清抗腦抗體濃度較健康人群明顯增高，并且可以持續(xù)較長時間；新西蘭大白兔腦皮層組織注射抗腦抗體1個月后，其谷氨酸表達以及凋亡均明顯高于對照組和免疫抑制組，三組兩兩比較有顯著性差異；在對新西蘭大白兔顱腦予以單側液壓打擊后，免疫抑制劑組新西蘭大白兔體內抗腦抗體峰值的出現(xiàn)較顱腦創(chuàng)傷組推遲，而且其峰值也比創(chuàng)傷組低；三組新西蘭大白兔血清中抗腦抗體濃度兩兩比較均有顯著性差異(P<0.05)，免疫抑制組新西蘭大

5、白兔創(chuàng)傷周圍腦組織谷氨酸表達以及凋亡計數(shù)明顯低于顱腦創(chuàng)傷組，兩組數(shù)值比較亦有顯著性差異(P<0.05)。 結論：1.健康人群血清中存在少量抗腦抗體；2.顱腦創(chuàng)傷后，血清中抗腦抗體與正常狀態(tài)相比將有明顯升高；3.顱腦創(chuàng)傷后體內升高的抗腦抗體導致神經(jīng)細胞凋亡和谷氨酸表達增高，顱腦創(chuàng)傷可能具有自身免疫性疾病的特點，自身免疫損害可能是顱腦創(chuàng)傷后繼發(fā)性腦損傷的重要原因；4.顱腦創(chuàng)傷后，免疫抑制治療通過降低組織免疫反應，可以降低自身抗腦抗體