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文檔簡(jiǎn)介
1、膽木(Nauclea officinalis Pierre ex Pitard)為茜草科烏檀屬植物,分布于我國(guó)的海南、廣西和廣東一帶,其莖、皮均可入藥,性味苦寒,具有清熱解毒、消腫止痛之功效。膽木的主要產(chǎn)品“膽木注射液”上市已有三十余年,臨床用于急性扁桃腺炎,急性咽喉炎、急性結(jié)膜炎及上呼吸道感染的治療。膽木注射液臨床療效確切,然而其化學(xué)成分和抗炎物質(zhì)基礎(chǔ)并不清楚。本文以膽木注射液為對(duì)象,采用傳統(tǒng)的柱分離技術(shù)與現(xiàn)代儀器聯(lián)用技術(shù)如GC/MS
2、、HPLC-UV/ESI/MSn,對(duì)膽木注射液的化學(xué)成分進(jìn)行了較為系統(tǒng)、全面和深入地研究。并結(jié)合體內(nèi)、體外藥效活性實(shí)驗(yàn),研究了膽木注射液中的部分單體化合物及大孔吸附樹(shù)脂不同溶劑洗脫部位的抗炎活性。取得了以下成果和結(jié)論:
1、從膽木注射液中分離和鑒定了9個(gè)單體,包括2個(gè)酚苷(1,2),5個(gè)吲哚類(lèi)生物堿苷(3,4,7~9)和2個(gè)喹啉酮類(lèi)生物堿苷(5,6)。其中1個(gè)單體(4)為新化合物,1個(gè)單體(1)為首次從該屬植物中分離得到,2個(gè)
3、單體(2,7)為首次從該植物中分離得到。它們分別是3,4-dimethoxyphenol-β-D-apiofuranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside(1),kelampayosideA(2),naucleamide A-10-O-β-D-glucopyranoside(3),naucleamide F-10-O-β-D-glucopyranoside(4),pumiloside(5),3-epipumilosi
4、de(6),3α,5α-tetrahydrodeoxycordifoline lactam(7),strictosamide(8),vincosamide(9)。
2、在上述工作基礎(chǔ)上,我們通過(guò)離子阱質(zhì)譜技術(shù)分析了膽木注射液中15個(gè)單體化合物的質(zhì)譜裂解行為,得到其質(zhì)譜裂解規(guī)律,進(jìn)而應(yīng)用HPLC-UV-ESI/IT/MSn技術(shù)推測(cè)了膽木注射液中的10個(gè)化合物,總共鑒定了膽木注射液中的25個(gè)化學(xué)成分,這些化學(xué)成分可為有機(jī)酚酸及其苷
5、、環(huán)烯醚萜苷和生物堿苷三類(lèi)。
此外,我們還首次應(yīng)用GC/MS技術(shù)對(duì)膽木注射液中易揮發(fā)、低沸點(diǎn)的成分進(jìn)行了研究,分離并鑒定了20個(gè)化合物。
3、建立同時(shí)測(cè)定膽木注射液中12個(gè)活性成分含量的方法。采用HPLC-DAD法,色譜柱Welch Material XB-C18(4.6mm×250 mm,5um),流動(dòng)相為乙腈(A)-0.1%甲酸水(B),梯度洗脫,流速1 mL·min-1,DAD掃描波長(zhǎng)190~400nm,基本實(shí)
6、現(xiàn)了12個(gè)成分和其它化合物的基線分離。12個(gè)成分的線性回歸系數(shù)均大于0.9999,重復(fù)性、回收率及準(zhǔn)確度均良好??勺鳛槟懩咀⑸湟旱馁|(zhì)量控制方法。
4、在基本闡明膽木注射液化學(xué)成分的基礎(chǔ)上,以膽木注射液不同溶劑洗脫部位(D101大孔樹(shù)脂水洗脫部位、10%EtOH洗脫部位和95%EtOH洗脫部位)及9個(gè)單體對(duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞模型產(chǎn)生NO的抑制作用,評(píng)價(jià)了其抗炎活性。結(jié)果表明:95%EtOH洗脫部位對(duì)NO有明顯
7、的抑制作用,9個(gè)單體對(duì)NO也有一定的抑制作用。進(jìn)一步以三個(gè)體內(nèi)模型評(píng)價(jià)了膽木注射液95%EtOH洗脫部位的抗炎藥效活性,結(jié)果表明,95%EtOH洗脫部位對(duì)雞蛋清致小鼠耳廓腫脹、大鼠足跖腫脹及醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增加均具有明顯的抑制作用,且效果好于同等劑量下的陽(yáng)性對(duì)照藥阿司匹林。
綜上所述,本文研究清楚了膽木注射液液的基本化學(xué)成分組成,其主要化學(xué)成分組成為有機(jī)酚酸及其苷、環(huán)烯醚萜苷和生物堿苷三類(lèi)。首次發(fā)現(xiàn)膽木及其注射液中含有
8、新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、3,4-dimethoxyphenol-β-D-apiofuranosyl(1→6)-β-D-glucopyranoside,kelampayoside A等6個(gè)酚酸及其苷;馬錢(qián)酸和7-脫氫馬錢(qián)酸乙酯2個(gè)環(huán)烯醚萜苷;naucleamide F-10-O-β-D-glucopyranoside和3α,5α-tetrahydrodeoxycordifoline lactam2個(gè)生物堿苷?;娟U明了膽木注射液抗炎物
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