HMGB1、NF-κB與炎性復(fù)合體在急性白血病患者中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：
　　本研究旨在檢測(cè)人高遷移率蛋白B1（high mobility group box protein1，HMGB1）、核因子-κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）及炎性復(fù)合體隱熱蛋白（NLR family，pyrin domain containing3，NLRP3）、黑色素瘤缺乏因子2（Absent in melanoma2，AIM2）、凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白（Apoptosis associat

2、ed speck like protein containing a CRAD，ASC）在不同類型及不同治療時(shí)期的成人急性白血病（acute leukemia，AL）患者中的表達(dá)水平，并探討其表達(dá)水平與急性白血病的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后之間的關(guān)系，有望為臨床上對(duì)急性白血病的診斷、治療及復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)等方面提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
　　方法：
　　1.研究對(duì)象：實(shí)驗(yàn)組為2013年7月至2014年7月在贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院血液科住院的19例急性

3、淋巴細(xì)胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）和41例急性非淋巴細(xì)胞白血?。╝cute non-lymphocytic leukemia，ANLL）共60例AL患者，根據(jù)疾病治療不同時(shí)期將實(shí)驗(yàn)組分為初治組、復(fù)發(fā)組及緩解組各20例；對(duì)照組選取同期住院的20例非惡性血液病患者；收集實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組患者外周血液及骨髓標(biāo)本。
　　2.研究方法：采用酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定法（Enzyme-Linked Imm

4、unosorbnent Assay，ELISA）檢測(cè)外周血血漿中HMGB1、NLRP3、AIM2、ASC抗原的表達(dá)水平；逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）檢測(cè)骨髓單個(gè)核細(xì)胞中HMGB1與NF-κB mRNA的表達(dá)水平；蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）檢測(cè)骨髓單個(gè)核細(xì)胞中HMGB1與NF-κB蛋白的表達(dá)水平；免疫組化（Immunoh

5、istochemistry，IHC）法檢測(cè)骨髓涂片中HMGB1與NF-κB的表達(dá)情況。
　　3.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS14.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，數(shù)據(jù)用x±s表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.ELISA檢測(cè)顯示：AL患者初治組與復(fù)發(fā)組外周血血漿中HMGB1抗原水平上調(diào)而炎性復(fù)合體NLRP3、AIM2、ASC抗原水平下調(diào)，與對(duì)照組比

6、較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；緩解組與對(duì)照組比較無顯著差異（P＞0.05）；ALL與ANLL比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　2.RT-PCR檢測(cè)顯示：HMGB1與NF-κB mRNA基因在AL初治組與復(fù)發(fā)組患者骨髓中表達(dá)與對(duì)照組相比明顯上調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而在緩解組患者中無明顯上調(diào)（P＞0.05）；ALL與ANLL比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　3.Western blo

7、t檢測(cè)顯示：HMGB1與NF-κB蛋白表達(dá)水平在AL初治組與復(fù)發(fā)組患者骨髓顯著升高，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而緩解組無明顯變化（P＞0.05）；ALL與ANLL比較無明顯差異表達(dá)（P＞0.05）。
　　4.IHC檢測(cè)顯示：HMGB1與NF-κB陽性表達(dá)主要集中在AL初治組與復(fù)發(fā)組患者骨髓涂片中，而AL緩解組和對(duì)照組骨髓涂片的陽性表達(dá)率低。
　　5.相關(guān)性分析顯示：AL患者外周血血漿HMGB1與炎性體NL

8、RP3、AIM2、ASC表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，但關(guān)聯(lián)度無顯著性意義；AL患者骨髓中HMGB1與NF-κB呈顯著正相關(guān)關(guān)系。
　　6.生存性分析顯示：HMGB1過表達(dá)AL患者生存期低于HMGB1非過表達(dá)AL患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.炎性復(fù)合體NLRP3、ASC及AIM2可能具有抗白血病免疫的作用。
　　2.HMGB1可能是通過激活NF-κB信號(hào)通路參與白血病的發(fā)生、發(fā)展過程。