電針對帕金森病模型大鼠線粒體膜電位及神經(jīng)黏附分子表達的影響.pdf

1、目的：帕金森病(PD)是一種常見的緩慢進展性中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，多發(fā)生于中老年人，是中老年人致殘的主要原因之一，隨年齡增長其患病率逐漸增高。其病理改變主要是中腦黑質(zhì)致密帶投射到紋狀體的多巴胺能神經(jīng)元大量死亡。其主要臨床癥狀有靜止性震顫、運動遲緩、肌強直和姿勢步態(tài)異常等。臨床治療目前以左旋多巴、多巴胺受體激動劑、單胺氧化酶B型抑制劑等藥物為主，但這些藥物均不能緩解病情進一步發(fā)展，而且長期使用有較強的毒副作用。外科手術(shù)治療療效不肯定且副作

2、用多，基因治療尚處于動物實驗階段。近年來，針灸作為一種獨特、安全、方便的治療方法已經(jīng)越來越多地運用于臨床，取得了較為肯定的療效。本課題研究電針對帕金森病大鼠旋轉(zhuǎn)行為、線粒體跨膜電位、神經(jīng)細胞黏附分子mRNA表達的影響，探討電針對帕金森病治療作用及其作用機理，為針灸臨床提供實驗依據(jù)。 方法： 采用右側(cè)黑質(zhì)注射微量6-OHDA誘導帕金森病大鼠模型，假手術(shù)組注射等體積的生理鹽水。造模4周后，腹腔注射APO(0.5mg/kg)誘

3、發(fā)旋轉(zhuǎn)，記錄30min內(nèi)的旋轉(zhuǎn)次數(shù)，超過7轉(zhuǎn)/min即為成功帕金森病模型。將造模成功的大鼠隨機分成模型組和電針組。電針組取風府、太沖(雙側(cè))進行治療，雙側(cè)太沖用28號0.5寸不銹鋼毫針針刺，風府用28號1寸不銹鋼毫針針刺，接G6805-2型電針治療儀(右側(cè)太沖與風府為一對電極)，連續(xù)波，頻率100Hz，強度1mA，留針15min，每天1次，6天為1療程，療程間隔1天，連續(xù)治療2療程，治療結(jié)束后取材檢測各項指標。 1．行為學檢測治

4、療結(jié)束后開始行為學檢測，給受試大鼠腹腔注射APO(0.5mg/Kg)，以誘發(fā)大鼠向健側(cè)(左側(cè))單向旋轉(zhuǎn)。每次在注射APO 15min后開始記錄，共記錄30min內(nèi)旋轉(zhuǎn)圈數(shù)，每周2次，連續(xù)2周。 2．線粒體跨膜電位檢測流式細胞儀測羅丹明熒光強度值，熒光強度值的高低反映神經(jīng)細胞線粒體跨膜電位的高低。 3．神經(jīng)細胞黏附分子mRNA表達的檢測原位雜交檢法檢測神經(jīng)細胞黏附分子mRNA表達。 4．電鏡下觀察帕金森病模型大鼠黑

5、質(zhì)神經(jīng)細胞超微結(jié)構(gòu)的變化。 檢測值統(tǒng)計處理的結(jié)果通過SPSS11.0軟件包處理。 結(jié)果： 1．帕金森病大鼠損毀側(cè)線粒體跨膜電位顯著低于正常組、假手術(shù)組及對側(cè)(p<0.01)。模型組損毀側(cè)線粒體跨膜電位顯著低于電針組(p<0.01)。各組未損毀側(cè)線粒體跨膜電位無明顯差異(P>0.05)。 2．模型組大鼠神經(jīng)細胞黏附分子mRNA表達陽性細胞數(shù)目低于正常組和假手術(shù)組(P<0.05)；電針組陽性細胞數(shù)目增多，與模

6、型組比較(P<0.05)；模型組染色積分光密度明顯低于正常組和假手術(shù)組(P<0.01)，電針組積分光密度較模型組高(P<0.01)。 3．針刺組大鼠黑質(zhì)神經(jīng)細胞變性程度低于模型組。 結(jié)論 1．電針可以使帕金森病模型大鼠中腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)細胞線粒體跨膜電位提高，延緩黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)細胞凋亡，提示針刺對其具有保護作用。 2．電針可促進帕金森病模型大鼠中腦黑質(zhì)神經(jīng)細胞黏附分子mRNA的表達，從而促進帕金森病模