體內(nèi)轉(zhuǎn)染RXRα基因及維生素A治療對(duì)小鼠肝纖維化的影響.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)旨在觀察補(bǔ)充外源性的視黃醇類(lèi)X受體RXRα及維生素A,對(duì)CCl<,4>誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化模型的干擾作用及對(duì)肝內(nèi)細(xì)胞增殖的影響.方法:本實(shí)驗(yàn)采用腹腔注射CCl<,4>的方法建立Balb/c小鼠的肝纖維化模型.造模第四周采用水動(dòng)力學(xué)為基礎(chǔ)的體內(nèi)基因轉(zhuǎn)染技術(shù)通過(guò)尾靜脈注射RXRα真核表達(dá)質(zhì)粒,連續(xù)四周,同時(shí)給予維生素A.用熒光顯微鏡檢測(cè)RXRα真核表達(dá)載體上綠色熒光蛋白的表達(dá)及用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)RXRα受體在肝內(nèi)的表達(dá),以此來(lái)證實(shí)體

2、內(nèi)基因轉(zhuǎn)染的成功.采用天狼猩紅染色及肝組織羥脯氨酸含量測(cè)定來(lái)檢測(cè)不同實(shí)驗(yàn)組肝纖維化的程度.BrdU體內(nèi)摻入法檢測(cè)肝內(nèi)細(xì)胞增殖情況.結(jié)論:1.該實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)采用水動(dòng)力學(xué)為基礎(chǔ)的體內(nèi)基因轉(zhuǎn)染技術(shù)可獲得外源性RXRα蛋白在小鼠肝臟內(nèi)較高水平較長(zhǎng)時(shí)間的表達(dá).2.該實(shí)驗(yàn)證實(shí)體內(nèi)轉(zhuǎn)染RXRα基因并給予小劑量維生素A可減輕由CCl4所引起的小鼠肝纖維化程度,而單用小劑量維生素A對(duì)肝纖維化沒(méi)有明顯作用.3.該實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)體內(nèi)轉(zhuǎn)染RXRα基因抑制CCl4所引起的