腺病毒介導(dǎo)人白介素10離體轉(zhuǎn)基因?qū)Υ笫笠浦哺闻K保護(hù)作用的研究.pdf

1、第一章研究再灌注損傷的大鼠肝移植模型的建立
　　目的:探討研究缺血再灌注損傷的大鼠肝移植模型的建立方法,為研究肝臟移植缺血再灌注損傷提供理想的動(dòng)物模型。
　　方法:采用改良Kamada’s二袖套法,改進(jìn)肝上下腔靜脈縫合及肝臟灌注方法,建立研究缺血再灌注損傷的大鼠肝移植模型。共實(shí)施大鼠肝移植120例,其中預(yù)實(shí)驗(yàn)40例,定型手術(shù)80例。
　　結(jié)果:80例定型手術(shù)中,供肝熱缺血時(shí)間0~5 min,冷缺血時(shí)間90 min,無(wú)肝

2、期平均為15~25min,手術(shù)成功率為85％(68/80)。
　　結(jié)論:大鼠采用改良Kamada’s二袖套法并改進(jìn)肝上下腔靜脈縫合及肝臟灌注方法,可建立穩(wěn)定的研究再灌注損傷的大鼠肝移植模型。
　　第二章腺病毒載體Ad-hIL-10對(duì)大鼠肝移植后再灌注損傷保護(hù)作用的研究
　　目的:研究腺病毒載體Ad-hIL-10對(duì)IRI的影響及機(jī)制。
　　方法:供體選用雌雄不拘SD大鼠,受體選用雄性SD大鼠。采用改良Kamada’

3、s二袖套法并改進(jìn)肝上下腔靜脈縫合及肝臟灌注方法建立肝移植模型。將大鼠分為為假手術(shù)組(Ⅰ組);空白對(duì)照組(Ⅱ組);空載體對(duì)照組(Ⅲ組);基因轉(zhuǎn)染組(Ⅳ組)。分別于移植手術(shù)后或假手術(shù)后24h處死大鼠,檢測(cè)血清ALT、AST、AKP、γ-GT,進(jìn)行IRI程度判定;肝組織HE染色做病理組織學(xué)檢查;RT-PCR檢測(cè)法測(cè)定肝組織的TNF-a、hIL-10表達(dá)水平;TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)果:Ⅳ組、Ⅲ組、Ⅱ組與Ⅰ組比較,各組血清ALT

4、、AST、AKP、γ-GT水平明顯升高(P<0.05);病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組病變范圍及IRI程度均較Ⅰ組明顯增加。而Ⅳ組與Ⅲ組、Ⅱ組比較,血清ALT、AST、AKP、γ-GT水平有所減輕(P<0.05);病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)病變范圍均較Ⅱ組、Ⅲ組有所降低,細(xì)胞凋亡程度減輕;Ⅳ組的TNF-αmRNA顯著降低(P<0.05)。
　　結(jié)論:Ad-hIL-10能抑制TNF-αmRNA的表達(dá),減輕IRI中肝細(xì)胞的調(diào)亡,對(duì)IRI起