EGFR-STAT3信號途徑阻斷對胃癌細胞淋巴生成相關(guān)因子表達及細胞生物學特點的影響研究.pdf

1、研究目的:
　　 采用單克隆抗體阻斷EGFR的激活，調(diào)節(jié)其下游調(diào)控基因STAT3的表達，進而抑制胃癌細胞對于淋巴生成相關(guān)因子(VEGF-C，VEGF-D)的表達。以證實單克隆EGFR抗體對于胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生發(fā)展的抑制作用，并分析EGFR/STAT3信號途徑阻斷對于何種分化程度的胃癌細胞生物學性質(zhì)改變顯著，對不同分化程度胃癌患者腫瘤的診斷、治療和預(yù)后判斷起指導(dǎo)作用。
　　 研究方法:
　　 1.選取常見的不同分化

2、程度人胃癌細胞株MKN-28(高分化)、SGC-7901（中分化）、MGC-803(低分化)及人正常胃黏膜上皮細胞株GES-1（對照），進行細胞傳代、培養(yǎng);
　　 2.流式細胞術(shù)及RT-PCR檢測不同分化程度胃癌細胞株EGFR表達水平;
　　 3.對于EGFR單克隆抗體(Nimotuzumabinjection，商品名:泰新生)處理前后，免疫組化及RT-PCR法分別檢測STAT3、p-STAT3、VEGF-C、VEGF-

3、D在不同分化胃癌細胞株[MKN-28(高分化)、SGC-7901（中分化）、MGC-803（低分化）及人正常胃黏膜上皮細胞株GES-1（對照）]中的蛋白及mRNA表達變化;
　　 4.檢測應(yīng)用EGFR單克隆抗體（泰新生）處理前后不同分化程度胃癌細胞的細胞凋亡（流式細胞術(shù)檢測）、細胞增殖(MTT法檢測)、細胞侵襲(Transwell小室檢測)、細胞周期（流式細胞術(shù)檢測）方面的細胞生物學特性;
　　 5.數(shù)據(jù)分析采用SPSS

4、17.0統(tǒng)計軟件進行處理，p＜0.05作為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.流式細胞術(shù)及RT-PCR檢測結(jié)果均顯示:人胃癌細胞株EGFR呈現(xiàn)高表達，不同胃癌細胞株EGFR的表達程度為MGC-803(低分化)＞SGC-7901（中分化）＞MKN-28(高分化)，胃癌細胞分化程度越低，EGFR表達越強(p＜0.05)。
　　 2.EGFR的表達和STAT3、VEGF-C、VEGF-D的表達變化趨勢同步，且表

5、達有相關(guān)性。
　　 3.胃癌細胞STAT3、p-STAT3、VEGF-C、VEGF-DmRNA及蛋白的表達，在EGFR單克隆抗體藥物處理組較未行藥物處理組顯著減弱(p＜0.05)。
　　 4.單克隆EGFR抗體藥物處理后，胃癌細胞增殖減慢、細胞凋亡加快、細胞侵襲性減弱、細胞周期停滯，藥物處理前后有統(tǒng)計學差異(p＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.人胃癌細胞株EGFR高表達，胃癌細胞分化程度越低，EGF