2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩110頁未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、研究背景 動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)發(fā)病機(jī)制的研究已經(jīng)經(jīng)歷了一個(gè)多世紀(jì),主要圍繞4種學(xué)說:脂肪浸潤學(xué)說、血小板聚集和血栓形成學(xué)說、平滑肌細(xì)胞克隆學(xué)說和損傷反應(yīng)學(xué)說,但至今詳細(xì)發(fā)病機(jī)理仍未完全闡明。近年來不少研究發(fā)現(xiàn),動(dòng)脈粥樣硬化的病理表現(xiàn)具有炎癥病理的基本表現(xiàn)形式:變質(zhì)、滲出和增生,其形成過程中也會(huì)出現(xiàn)類似類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性胰腺炎和肝硬化等慢性炎癥性疾病的細(xì)胞間相互作用,隨著炎癥細(xì)胞和炎癥介質(zhì)的不斷檢

2、出,動(dòng)脈粥樣硬化不再被認(rèn)為是單純的動(dòng)脈壁脂質(zhì)堆積的疾病,而是進(jìn)展性炎癥反應(yīng),符合炎癥表現(xiàn)的普遍規(guī)律。目前,在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)現(xiàn)的促炎因子較多,如血小板源性生長因子β(PDGF-β)、血小板衍生因子(PDEF)、單核細(xì)胞趨化蛋白1、白細(xì)胞介素3、環(huán)氧合酶-2、基質(zhì)金屬蛋白酶、去組合蛋白、脂肪酸結(jié)合蛋白等,由于目前臨床針對(duì)上述介質(zhì)的抗動(dòng)脈粥樣硬化藥物起效緩慢且療效有待提高,因此是否還有其它炎癥因子參與動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展有待進(jìn)一步研究。FIZZ1

3、(Found in Inflammatory Zone 1)是2000年新發(fā)現(xiàn)的一個(gè)與炎癥相關(guān)的缺氧誘導(dǎo)有絲分裂因子,是運(yùn)用表達(dá)序列標(biāo)記數(shù)據(jù)庫掃描的方法發(fā)現(xiàn)的一種分泌型蛋白,分子量9.4KD,具有刺激肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、收縮血管、促進(jìn)血管新生、刺激肌纖維母細(xì)胞分化等功能,在脂肪組織的間質(zhì)血管以及選擇性激活的巨噬細(xì)胞中均有表達(dá),缺氧的肺血管壁也有表達(dá),在實(shí)驗(yàn)性肺纖維化、哮喘、過敏性肺炎、寄生蟲感染等疾病中具有重要意義,其在動(dòng)脈粥樣硬化中

4、是否表達(dá)則為未知,由于動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)存在Th2型細(xì)胞因子以及大量激活的巨噬細(xì)胞,動(dòng)脈粥樣硬化的血管壁也存在缺氧,因此,我們推測(cè)在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)可能有FIZZ1表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)FIZZ1表達(dá),RT-PCR檢測(cè)FIZZ1mRNA表達(dá),并探討FIZZ1對(duì)體外培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞增殖,平滑肌細(xì)胞清道夫受體SR-A,巨噬細(xì)胞CD36表達(dá)影響,同時(shí)探討降脂治療對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊FIZZ1表達(dá)的影響。

5、研究方法 本研究分三部分,第一部分:選取C57BL/6J ApoE基因敲除鼠及C57BL/6J野生型小鼠,分別喂食高脂飼料及普通飼料,24周后處死小鼠,石蠟包埋血管后作連續(xù)切片,行HE染色及FIZZ1免疫組化染色,檢測(cè)斑塊FIZZ1表達(dá)情況,RT-PCR檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)FIZZ1mRNA表達(dá),然后,模擬粥樣斑塊內(nèi)細(xì)胞因子環(huán)境,用Th2型細(xì)胞因子刺激培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞,RT-PCR以及激光共聚焦顯微鏡觀察刺激后細(xì)胞

6、FIZZ1mRNA及其蛋白表達(dá)情況,初步鑒定粥樣斑塊內(nèi)分泌FIZZ1的可能的細(xì)胞;第二部分用終濃度分別為3×10<'-6>mmol/L,9×10<'-6>mmol/L,2.7×10<'-5>mmol/L的FIZZ1刺激培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞,<'3>H摻入法以及MTT法測(cè)定FIZZ1對(duì)平滑肌細(xì)胞增殖的影響;用ox-LDL以及終濃度分別為3×10<'-6>mmol/L,9×10<'-6>mmol/L,2.7×10<'-5>mmol/L的FIZZ

7、1刺激培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞,蛋白質(zhì)印跡技術(shù)確認(rèn)SR-A表達(dá)后,激光共聚焦顯微鏡對(duì)SR-A表達(dá)進(jìn)行定位,用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)FIZZ1對(duì)平滑肌細(xì)胞SR-A及其巨噬細(xì)胞CD36表達(dá)的影響,評(píng)價(jià)FIZZ1能否影響動(dòng)脈粥樣硬化吞噬脂質(zhì)的關(guān)鍵受體。第三部分:制作動(dòng)脈粥樣硬化以及高脂血癥動(dòng)物模型,然后用辛伐他汀干預(yù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,21周后,用免疫組化方法檢測(cè)粥樣斑塊FIZZ1蛋白表達(dá)情況,RT-PCR方法檢測(cè)FIZZ1mRNA表達(dá)情況,同時(shí)檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形

8、態(tài)及其血脂水平,探討調(diào)脂治療對(duì)FIZZ1表達(dá)的影響。 結(jié)果 1.ApoE基因敲除鼠高脂飼養(yǎng)24周后,主動(dòng)脈根部明顯形成動(dòng)脈粥樣硬化,斑塊體積大,免疫組化可見FIZZ1在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)明顯表達(dá),RT-PCR可見FIZZ1mRNA表達(dá),同齡野生型C57BL/6J鼠正常血管壁內(nèi),未見FIZZ1表達(dá),Th2型細(xì)胞因子能刺激培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞表達(dá)FIZZ1,但不能刺激體外培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞表達(dá)FIZZ1。 2.MTT檢測(cè)平滑

9、肌細(xì)胞增殖提示,F(xiàn)IZZ1 3×10<'-6>mmol/L組與對(duì)照組吸光度值比較,明顯升高,P<0.05,差異有顯著性;FIZZ1 9×10<'-6>mmol/L,組與FIZZ1 3×10<'-6>mmol/L組比較,吸光度值明顯升高,差異有顯著性,P<0.05,F(xiàn)IZZ1 2.7×10<'-5>mmol/L組與9×10<'-6>mmol/L組比較,吸光度值明顯升高,差異有顯著性,說明FIZZ1能刺激平滑肌細(xì)胞增殖。<'3>H-TdR摻

10、入法檢測(cè)也提示:FIZZ1刺激平滑肌細(xì)胞增殖。 3.激光共聚焦顯微鏡可見在ox-LDL刺激24小時(shí)的平滑肌細(xì)胞,有SR-A表達(dá),主要位于細(xì)胞膜,蛋白質(zhì)印跡技術(shù)發(fā)現(xiàn)ox-LDL能促進(jìn)平滑肌細(xì)胞SR-A表達(dá)。 4.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)提示,F(xiàn)IZZ1 3×10<'-6>mmol/L組與對(duì)照組SR-A表達(dá)陽性率比較,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有極顯著性差異(P<0.01);FIZZ1 9×10<'-6>mmol/L組與FIZZ1 3×10<'-6>m

11、mol/L組SR-A表達(dá)陽性率比較,有顯著性差異(P<0.05),F(xiàn)IZZ1 2.7×10<'-5>mmol/L組與9×10<'-6>mmol/L組SR-A表達(dá)陽性率比較,有極顯著性差異(P<0.01),說明FIZZ1能明顯促進(jìn)ox-LDL刺激的平滑肌細(xì)胞SR-A表達(dá)。 5.ox-LDL明顯刺激巨噬細(xì)胞CD36表達(dá),F(xiàn)IZZ1不影響體外培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞清道夫受體CD36的表達(dá),說明FIZZ1不能通過影響巨噬細(xì)胞CD36表達(dá)來影響

12、巨噬細(xì)胞ox0-LDL的攝取,影響動(dòng)脈粥樣硬化。 6.Apoe基因敲除鼠高脂飼養(yǎng)21周后,主動(dòng)脈根部明顯形成動(dòng)脈粥樣硬化,血脂代謝明顯紊亂,免疫組化可見FIZZ1在粥樣硬化斑塊內(nèi)明顯表達(dá),辛伐他汀能降低動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)FIZZ1mRNA及其蛋白表達(dá)(與對(duì)照組比較,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05)。 結(jié)論 1.FIZZ1在ApoE基因敲除鼠粥樣斑塊內(nèi)明顯表達(dá),同齡野生型C57BL/6J鼠血管壁內(nèi),F(xiàn)IZZ1不表

13、達(dá),F(xiàn)IZZ1可能為一種新的影響動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展的促炎因子。 2.Th2型細(xì)胞因子可以刺激巨噬細(xì)胞FIZZ1表達(dá),但不能刺激平滑肌細(xì)胞FIZZ1表達(dá),Th2型細(xì)胞因子刺激巨噬細(xì)胞可能為斑塊內(nèi)FIZZ1表達(dá)機(jī)理之一。 3.FIZZ1明顯刺激體外培養(yǎng)的主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖。 4.FIZZ1不影響體外培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞清道夫受體CD36的表達(dá),F(xiàn)IZZ1能促進(jìn)ox-LDL誘導(dǎo)的體外培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞SR-A表達(dá),從而可能加速

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論