原發(fā)性肝癌ATM基因表達(dá)及其輻射增敏機(jī)制研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文原發(fā)性肝癌ATM基因表達(dá)及其輻射增敏機(jī)制研究姓名：李高峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：放射腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：陳龍華20080420中文摘要阻滯或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，是決定細(xì)胞輻射敏感性的一個(gè)重要因素，而P 2 1 是野生型P 5 3 細(xì)胞經(jīng)歷細(xì)胞周期阻滯或凋亡的關(guān)鍵。目前對(duì)腫瘤輻射增敏基因治療方面的研究主要集中在以下幾個(gè)方面：l 、抑制D N A 損傷修復(fù)基因功能，如A T M 、D N A ．P K ；2 、抑制／調(diào)控細(xì)胞周

2、期關(guān)卡基因，如P 1 6 、P 2 1 ；3 、恢復(fù)某些抑癌基因的功能，如P 5 3 等；4 、抑制相關(guān)癌基因的表達(dá)，如M D M 2 ，R A S 等。放射生物學(xué)研究表明，肝臟屬于放射晚反應(yīng)組織，具有較強(qiáng)的亞致死損傷修復(fù)能力，所以表現(xiàn)出對(duì)輻射的抗拒。既往研究證實(shí)：肝癌中存在P 5 3 等基因突變，不同P 5 3 狀態(tài)肝癌細(xì)胞各自D N A 損傷修復(fù)能力不同。是否正是上述基因突變或者還是存在其他某種機(jī)制使得D N A 損傷修復(fù)基因功能異

3、常上調(diào)，肝癌才表現(xiàn)出相對(duì)輻射抗拒，這些正是本研究中所要回答的問(wèn)題。目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)肝癌輻射增敏基因治療相關(guān)報(bào)道。如果選擇性抑制肝癌細(xì)胞照射后的D N A 損傷修復(fù)能力，可提高肝癌對(duì)放射線的敏感性。A T M 基因是調(diào)控D N A 損傷反應(yīng)的關(guān)鍵基因，直接抑制A T M 蛋白激酶活性，降低A T M 蛋白激酶對(duì)D N A 損傷反應(yīng)的調(diào)控作用，從而獲得高輻射敏感性；逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以將外源基因準(zhǔn)確的整合至宿主細(xì)胞的基因組中，使該外源基因穩(wěn)定

4、、長(zhǎng)期表達(dá)，同時(shí)，逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以將外源基因準(zhǔn)確的整合使其轉(zhuǎn)導(dǎo)肝癌細(xì)胞具有相對(duì)特異性，使肝臟這樣的低分裂組織局部應(yīng)用較為合適。結(jié)合臨床三維適形放療技術(shù)，可以達(dá)到避免抑制肝癌周?chē)８渭?xì)胞的D N A 損傷修復(fù)功能。R N A 干擾( I Ⅲ礎(chǔ)，R N A i n t e r f e r e n c e ) 是一種序列特異的轉(zhuǎn)錄后基因沉默現(xiàn)象( P T G S ，p o s t t r a n s c r i p t i o n a l

5、g e n e s i l e n c i n g ) ，主要通過(guò)核酸酶將雙鏈R N A 切割成2 1 ．2 5 n t 的干擾性小R N A 即s i R N A ( s m a l li n t e r f e r i n gR N As h o r t i m e r f e n n g R N A ) ，由s i R N A 介導(dǎo)識(shí)別并切割同源性靶m R N A 分子而實(shí)現(xiàn)。s i R N A 能高效特異性的阻抑基因的表達(dá)，R