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1、南方醫(yī)科大學博士學位論文原發(fā)性肝癌ATM基因表達及其輻射增敏機制研究姓名:李高峰申請學位級別:博士專業(yè):放射腫瘤學指導教師:陳龍華20080420中文摘要阻滯或誘導細胞凋亡,是決定細胞輻射敏感性的一個重要因素,而P 2 1 是野生型P 5 3 細胞經(jīng)歷細胞周期阻滯或凋亡的關(guān)鍵。目前對腫瘤輻射增敏基因治療方面的研究主要集中在以下幾個方面:l 、抑制D N A 損傷修復基因功能,如A T M 、D N A .P K ;2 、抑制/調(diào)控細胞周
2、期關(guān)卡基因,如P 1 6 、P 2 1 ;3 、恢復某些抑癌基因的功能,如P 5 3 等;4 、抑制相關(guān)癌基因的表達,如M D M 2 ,R A S 等。放射生物學研究表明,肝臟屬于放射晚反應組織,具有較強的亞致死損傷修復能力,所以表現(xiàn)出對輻射的抗拒。既往研究證實:肝癌中存在P 5 3 等基因突變,不同P 5 3 狀態(tài)肝癌細胞各自D N A 損傷修復能力不同。是否正是上述基因突變或者還是存在其他某種機制使得D N A 損傷修復基因功能異
3、常上調(diào),肝癌才表現(xiàn)出相對輻射抗拒,這些正是本研究中所要回答的問題。目前國內(nèi)外尚未見肝癌輻射增敏基因治療相關(guān)報道。如果選擇性抑制肝癌細胞照射后的D N A 損傷修復能力,可提高肝癌對放射線的敏感性。A T M 基因是調(diào)控D N A 損傷反應的關(guān)鍵基因,直接抑制A T M 蛋白激酶活性,降低A T M 蛋白激酶對D N A 損傷反應的調(diào)控作用,從而獲得高輻射敏感性;逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以將外源基因準確的整合至宿主細胞的基因組中,使該外源基因穩(wěn)定
4、、長期表達,同時,逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以將外源基因準確的整合使其轉(zhuǎn)導肝癌細胞具有相對特異性,使肝臟這樣的低分裂組織局部應用較為合適。結(jié)合臨床三維適形放療技術(shù),可以達到避免抑制肝癌周圍正常肝細胞的D N A 損傷修復功能。R N A 干擾( I Ⅲ礎(chǔ),R N A i n t e r f e r e n c e ) 是一種序列特異的轉(zhuǎn)錄后基因沉默現(xiàn)象( P T G S ,p o s t t r a n s c r i p t i o n a l
5、g e n e s i l e n c i n g ) ,主要通過核酸酶將雙鏈R N A 切割成2 1 .2 5 n t 的干擾性小R N A 即s i R N A ( s m a l li n t e r f e r i n gR N As h o r t i m e r f e n n g R N A ) ,由s i R N A 介導識別并切割同源性靶m R N A 分子而實現(xiàn)。s i R N A 能高效特異性的阻抑基因的表達,R
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