原發(fā)性肝癌的基因治療進(jìn)展

1、原發(fā)性肝癌的基因治療進(jìn)展原發(fā)性肝癌的基因治療進(jìn)展ProgressofgenetherapyinPHC湯勇，周訓(xùn)平，王曉芹勇，周訓(xùn)平，王曉芹（第三軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室，重慶400038）[關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞]原發(fā)性肝癌；基因治療；RNA干擾[中圖分類(lèi)號(hào)中圖分類(lèi)號(hào)]R[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]B[文章編號(hào)文章編號(hào)]16725042(2009)03000000[基金項(xiàng)目基金項(xiàng)目]第三軍醫(yī)大學(xué)訓(xùn)練部創(chuàng)新基金（2008）[收稿日期收稿日期]20090

2、120[修回日期修回日期]20090216原發(fā)性肝癌(Primaryhepaticcarcinoma，PHC)是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。目前對(duì)PHC主要治療方法有手術(shù)治療、放療、化療以及綜合治療等，然而治療效果并不理想。隨著分子生物學(xué)和免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展，基因治療技術(shù)在腫瘤的治療中具有廣闊的前景?；蛑委煹姆绞接袃深?lèi)，一類(lèi)為基因矯正和置換，即將缺陷基因的異常序列進(jìn)行校正，對(duì)缺陷基因行精確的原位修復(fù)；另一類(lèi)為基因增補(bǔ)，不去除異?；颍峭ㄟ^(guò)外

3、源基因的非定點(diǎn)整合，使其表達(dá)正常產(chǎn)物，從而補(bǔ)償缺陷基因的功能，達(dá)到治療目的的一種方法。本文就原發(fā)性肝癌的基因治療進(jìn)展綜述如下。1反義基因治療反義基因治療肝癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中許多癌基因及生長(zhǎng)因子的基因產(chǎn)物大量表達(dá)，應(yīng)用反義核酸在轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平阻斷某些基因的異常表達(dá)，以期阻斷癌細(xì)胞內(nèi)的異常信號(hào)傳導(dǎo)，使癌細(xì)胞進(jìn)入正常分化軌道或引起細(xì)胞凋亡，從而抑制腫瘤的生長(zhǎng)。反義基因包括反義RNA、反義DNA和核酶3類(lèi)。根據(jù)堿基互補(bǔ)的原理，利用與目標(biāo)基

4、因特定序列互補(bǔ)的短鏈核苷酸片段來(lái)封閉目標(biāo)基因表達(dá)，或利用核酶與相應(yīng)的mRNA結(jié)合使其降解，均可達(dá)到基因治療的目的。Wang等[1]利用AFP反義寡核苷酸治療體外和裸鼠的SMMC7721肝癌模型取得了明顯的抗癌作用，減少了AFP的表達(dá)，抑制SMMC7721細(xì)胞的增生。有研究顯示[2]，引用反義胰島素養(yǎng)生長(zhǎng)因子(InsulingrowthfactI，IGFI)寡核苷酸轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)肝癌細(xì)胞的凋亡陽(yáng)性指數(shù)明顯增加，并且被轉(zhuǎn)染的癌細(xì)胞的C

5、EA和AFP的分泌下降，表明反義IGFI寡核苷酸可以抑制肝癌細(xì)胞的增殖、促進(jìn)分化并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡。2自殺基因治療自殺基因治療某些病毒、細(xì)菌等原核生物含有一類(lèi)基因，其編碼的酶能將原來(lái)無(wú)毒的藥物前體轉(zhuǎn)化為具有細(xì)胞毒性的代謝物而殺傷宿主細(xì)胞，這類(lèi)基因稱(chēng)為“自殺基因”。這種特有的轉(zhuǎn)換酶基因自殺基因?qū)塍w內(nèi)后，利用其產(chǎn)生的酶將無(wú)毒或低毒的藥物前體轉(zhuǎn)成細(xì)胞毒性代謝產(chǎn)物，從而殺死腫瘤細(xì)胞，近年來(lái)顯示出良好的應(yīng)用前景。目前常用針對(duì)肝癌基因治療的有單

6、純病毒Ⅰ型胸苷嘧啶激酶戊環(huán)鳥(niǎo)苷系(HSVTKGCV)和胞嘧啶脫氨酶5氟胞嘧啶(CD5Fc)等系統(tǒng)。有研究表明[3]，將“自殺基因”單純皰疹病毒胸腺嘧啶激酶(HerpesSimplexVirusThyineKinease，HSVTK)轉(zhuǎn)染腫瘤組織，則該細(xì)胞的HSVTK將前體藥Gancyclovir(GCV)轉(zhuǎn)化為對(duì)分裂細(xì)胞有殺傷作用的代謝產(chǎn)物，特異性殺傷腫瘤細(xì)胞，對(duì)肝細(xì)胞肝癌在體外有一定的療效。Won等[4]通過(guò)單純皰疹病毒將AFP反轉(zhuǎn)剪

7、接靶RNA構(gòu)成酶導(dǎo)入肝癌細(xì)胞，取代HCC高效表達(dá)AFP的RNA殘基，結(jié)果明顯延緩腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)并降低了細(xì)胞中表達(dá)AFP的RNA水平。3免疫基因治療免疫基因治療的表達(dá)，達(dá)到抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用，為惡性腫瘤的基因治療提供了新的技術(shù)方法。除了上述介紹的六種比較經(jīng)典的基因治療方法外，近年又出現(xiàn)了一些新的基因治療方法。有專(zhuān)家設(shè)想利用超聲微氣泡介導(dǎo)目的基因進(jìn)入靶組織的靶胞內(nèi)[11]，可以達(dá)到靶向性、可控性轉(zhuǎn)導(dǎo)基因治療的目的，有望成為有實(shí)用價(jià)值的臨床基因

8、治療技術(shù)。還有專(zhuān)家認(rèn)為不同的基因治療策略聯(lián)合應(yīng)用可相互協(xié)同，常采用免疫基因和自殺基因的聯(lián)合治療[12]，在增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤免疫能力同時(shí)直接殺傷腫瘤細(xì)胞，達(dá)到根治腫瘤、防止轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)的目的。7展望展望目前肝癌的基因治療策略已有很大發(fā)展，具有廣闊的應(yīng)用前景，而早期臨床證據(jù)和臨床實(shí)驗(yàn)表明，基因作為一種藥物有重要的地位，將來(lái)的發(fā)展方向主要集中在下列幾方面：①尋找轉(zhuǎn)染效率高、基因容量高、毒性小的基因治療載體。近年來(lái)，利用超聲對(duì)比劑微泡作為基因載體并

9、用超聲技術(shù)處理，提高轉(zhuǎn)染率已取得成功[1315]；②開(kāi)發(fā)基因，實(shí)現(xiàn)可調(diào)控的基因轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，以期提高在肝癌組織中的表達(dá)陽(yáng)性率，進(jìn)行更加精確的基因治療；③設(shè)計(jì)更具靶向性和安全性的基因轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，尋找肝癌特異轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件，從而使外源基因能夠持續(xù)、穩(wěn)定和特異表達(dá)，真正實(shí)現(xiàn)肝癌的基因治療從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)轉(zhuǎn)向臨床應(yīng)用，將是肝癌基因治療的主要研究方向。盡管還存在很多需要解決的問(wèn)題，但隨著分子生物學(xué)及相關(guān)學(xué)科的發(fā)展，我們相信肝癌的基因治療終將會(huì)廣泛地應(yīng)用于臨床。

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