真菌竹黃活性成分的藥理作用研究.pdf

1、目的:本研究旨在分離天然藥物真菌竹黃中具有藥理作用的活性成分;以TNFα誘導(dǎo)的小鼠成纖維細(xì)胞L929為細(xì)胞模型，初步探索真菌竹黃活性成分雙向調(diào)控細(xì)胞增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)及分子機(jī)理;以人胃癌細(xì)胞BGC823為細(xì)胞模型，研究真菌竹黃活性成分對(duì)BGC823細(xì)胞的增殖抑制作用。
　　 方法:(1)索式提取法和聚酰胺層析柱法分離真菌竹黃中調(diào)控細(xì)胞增殖的活性成分;(2) SRB法測(cè)定竹黃組分extA、extB、extC、extD對(duì)L929、BGC

2、823的增殖抑制情況;(3) Hoechst染色法觀察L929、BGC823的細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;(4)Western Blotting檢測(cè)L929內(nèi)NF-κB、COX-2、FLIP蛋白表達(dá)水平，檢測(cè)BGC823內(nèi)NF-κB、FLIP蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:(1)結(jié)合傳統(tǒng)提取法及現(xiàn)代提取工藝，將真菌竹黃初步分離為組分extA、extB、extC、extD;(2) extA在0.03μg/ml-3.75μg/ml時(shí)，可有效拮抗TN

3、Fα對(duì)L929的增殖抑制作用，7.5μg/ml時(shí)則促進(jìn)其增殖抑制作用;(3) extA可有效拮抗TNFα誘導(dǎo)的L929中NF-κB蛋白表達(dá)增加的過程，具有時(shí)效性，對(duì)COX-2蛋白表達(dá)水平影響不大，同時(shí)抑制TNFα誘導(dǎo)的FLIP表達(dá)水平下降過程，呈濃度正相關(guān)依賴趨勢(shì);(4) extA、extB可有效抑制BGC823增殖，且extB抑制增殖能力更強(qiáng);(5) extB可上調(diào)BGC823中的NF-κ B、FLIP蛋白表達(dá)水平，呈濃度正相關(guān)依賴趨