CD3+CD4-CD8-T(DNT)細胞對PC-3荷瘤小鼠腫瘤的抑制作用及其體外擴增的實驗研究.pdf

1、細胞免疫治療已經(jīng)成為繼手術(shù)、放療、化療后第四種惡性腫瘤的治療方法。CD3＋ CD4－CD8－T（double negative Tcells,DNT）細胞是一種新型的過繼免疫治療細胞。
　　目的：是探討DNT細胞對PC-3荷瘤小鼠腫瘤的抑制作用及其體外擴增的實驗研究。
　　方法：
　　1、建立前列腺癌荷瘤小鼠模型：將SCID小鼠隨機分成3組，皮下注射不同劑量PC-3細胞以建立荷瘤SCID小鼠人非激素依賴性前列腺癌皮下腫

2、瘤模型。
　　2、利用Rosettesep抗體吸附法和Easysep免疫磁珠法從正常人外周血分離、擴增、純化DNT細胞，利用流式細胞儀鑒定其純度。
　　3、DNT細胞在PC-3荷瘤小鼠體內(nèi)抑制腫瘤生長的作用：當(dāng)皮下荷前列腺癌小鼠腫瘤生長至0.3cm×0.3cm大小時，隨機分為3組，第1組給予DNT細胞尾靜脈注射，第2組予PBS尾靜脈注射，第3組給予CD8+T細胞尾靜脈注射。監(jiān)測SCID小鼠的體重、一般狀態(tài)，每4天測量PC-3

3、荷瘤小鼠腫瘤的體積。治療28天，處死小鼠，剝除瘤組織，測量腫瘤重量并計算抑瘤率。
　　結(jié)果：皮下注射0.5×106個PC-3細胞即可成功建立人非激素依賴性前列腺癌系PC-3細胞荷瘤SCID小鼠模型；通過Rosettesep抗體吸附法和Easysep免疫磁珠法分離、擴增、純化人外周血DNT細胞，采用流式細胞儀檢測，DNT細胞純度在98％以上；體外擴增的DNT細胞對荷人非激素依賴性前列腺癌SCID小鼠皮下移植瘤具有抑制腫瘤生長作用，腫