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1、目的:本研究主要為人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、鑒定建立一套完整的SOP標(biāo)準(zhǔn)化體系,為人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)化提供安全性的證據(jù),為人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成功應(yīng)用于臨床研究打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
方法:人新鮮臍帶剝除血管,取其華通式膠,并采用機(jī)械方法進(jìn)行培養(yǎng),并將其不同代數(shù)的細(xì)胞(P1-P9)進(jìn)行病原學(xué)、形態(tài)學(xué)、流式學(xué)的檢測(cè),以便明確所得細(xì)胞是否為間充質(zhì)干細(xì)胞,并對(duì)純度較高代數(shù)的細(xì)胞(P3-P6)進(jìn)行增殖實(shí)驗(yàn)、核型分析、急性毒性實(shí)驗(yàn)
2、,慢性毒性實(shí)驗(yàn)、過敏實(shí)驗(yàn)、致瘤性進(jìn)行相關(guān)的研究,以便明確臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的安全性。
結(jié)果:臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)方法成熟,細(xì)胞形態(tài)良好,病原學(xué)檢測(cè)未見細(xì)菌真菌以及其他病原,流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)細(xì)胞純度較高,細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)顯示細(xì)胞在3-4天達(dá)到一個(gè)增殖高峰,細(xì)胞核型分析未見到細(xì)胞染色體的丟失、畸形以及其他的變異,急性毒性實(shí)驗(yàn)是安全的,慢性毒性實(shí)驗(yàn)各組織器官切片未見異常,過敏實(shí)驗(yàn)未見動(dòng)物過敏及死亡情況,致瘤實(shí)驗(yàn)未見注射部位形成腫瘤。
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