人羊膜間充質干細胞移植治療大鼠腦損傷.pdf

1、研究背景：腦損傷是嚴重威脅人類健康的疾病之一。目前對重度腦損傷導致的神經功能缺失，治療難以達到滿意的效果。近年來干細胞研究的進展給腦損傷的治療帶來了希望，取得了令人鼓舞的治療效果。干細胞移植治療腦損傷能夠改善宿主的神經功能，可能的機制有：外源性干細胞在宿主體內的內分泌作用和機體自身神經細胞的旁分泌作用，使局部的神經營養(yǎng)因子聚集，改善了神經細胞的生存環(huán)境，使外源性干細胞更易向神經細胞轉化并與宿主的神經細胞建立突觸聯(lián)系，具體的確切機制仍需進

2、一步研究。目前移植干細胞治療腦損傷的途徑有腦損傷區(qū)原位移植、通過腦脊液循環(huán)及血液循環(huán)進行移植，均能對神經功能有所改善。采用何種移植途徑能最大程度改善宿主的神經功能，尚沒有明確的結論。對各種移植途徑進行治療效果系統(tǒng)比較的研究報道尚未見到，實驗將給與探討，為干細胞移植治療腦損傷提供實驗依據(jù)。干細胞移植治療腦損傷的研究手段多是采用處死動物后獲取組織標本，進行病理學的觀察。如何活體觀察外源性干細胞在宿主體內的存活情況，是干細胞移植研究的難點和重

3、點。在小鼠胚胎干細胞移植治療大鼠腦損傷的研究方面，應用1.5T核磁共振儀成功進行了活體觀察，取得了滿意的觀察效果。在人羊膜間充質干細胞移植治療腦損傷的研究方面，報道較少，有關活體示蹤羊膜間充質干細胞在宿主體內存活情況的研究也沒有見到報道。本文采用人羊膜間充質干細胞進行體外標記后移植治療腦損傷大鼠，3.0T核磁共振活體示蹤細胞的存活遷移情況。
　　 研究表明，神經生長因子對神經元的生長分化及功能的維持具有重要作用。神經生長因子誘導

4、干細胞向神經元樣細胞轉化的研究已有多篇報道，聯(lián)合神經生長因子與外源性干細胞移植治療腦損傷有人進行了研究，對宿主神經功能的改善有一定作用。在腦損傷區(qū)長期維持神經生長因子的有效濃度，是神經生長因子聯(lián)合干細胞移植治療腦損傷的關鍵問題，由于神經生長因子通過血腦屏障能力弱，外周血管給藥的途徑難以有效進入腦損傷區(qū)，另外神經生長因子半衰期短，難以在腦損傷區(qū)長久維持有效濃度，因此如何使神經生長因子進入腦損傷區(qū)并維持有效濃度仍需進一步研究。本文采用量子點

5、觀察神經生長因子納米化后進入羊膜間充質干細胞的情況，通過羊膜間充質干細胞攜帶神經生長因子進入腦損傷區(qū)，取得了滿意的效果。
　　 外源性干細胞移植入機體后，對宿主的影響目前尚無明確結論，仍需要研究人員進行探討。本文通過采集血液檢測血常規(guī)及腫瘤標志物，了解干細胞移植對腦損傷大鼠的影響，并通過核磁共振觀察有無新生物出現(xiàn)。
　　 綜合以上研究情況，我們將在人羊膜間充質干細胞移植治療腦損傷的移植途徑、神經生長因子的給藥方法、羊膜間

6、充質干細胞移植治療腦損傷對機體的影響及活體示蹤進行探討，為腦損傷的臨床治療提供依據(jù)。
　　 結論：
　　 酶消化法能夠從人羊膜組織中分離提取出MSCs，經bFGF和全反式維甲酸體外誘導，能夠分化為神經元樣細胞，證實人羊膜MSCs具有多分化潛能。
　　 量子點神經生長因子納米顆粒（QDs-NGF-NPs）及菲力磁可以在體外成功標記羊膜MSCs，濃度小于40μg/L的QOs-NGF-NPs及濃度小于30μg/ml的菲

7、力磁對羊膜MSCs的生長分化沒有影響。
　　 腦損傷區(qū)移植羊膜間充質干細胞較尾靜脈及側腦室移植能更大程度改善大鼠的神經功能。
　　 神經生長因子納米化顆粒能有效進入羊膜MSCs，經腦損傷區(qū)原位移植能有效改善腦損傷大鼠的神經功能。
　　 羊膜MSCs經菲立磁標記移植大鼠后，能夠在腦損傷區(qū)存活分化，借助3.0T核磁共振儀能有效觀察到羊膜MSCs移植后的存活情況。
　　 經QDs-NGF-NPs及菲力磁標記的羊