伊馬替尼對白血病相關(guān)抗原RHAMM特異性CD8+ T細(xì)胞和CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞抑制的研究.pdf

1、東南大學(xué)發(fā)育與疾病相關(guān)基因教育部重點實驗室伊馬替尼是治療慢性粒細(xì)胞性白血病(CML)的高效藥物。對于異基因干細(xì)胞移植(allo-SCT)后有殘留病灶或復(fù)發(fā)的病人來說，理想的治療策略還在爭論之中：單獨的供者淋巴細(xì)胞輸注(DLIs)、單獨使用伊馬替尼或兩者的結(jié)合都在臨床使用之中。鑒于已經(jīng)有報導(dǎo)伊馬替尼對抗病毒特異性的CD8+T淋巴細(xì)胞有抑制作用，我們覺得有必要探討該藥是否也對抗白血病特異性的CD8+T淋巴細(xì)胞有損害作用。另外，對CD4+CD

2、25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)的影響也值得進一步探討。伊馬替尼可能會影響殺傷性T細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞兩者之間的平衡。首先，我們用混合淋巴細(xì)胞肽培養(yǎng)(MLPC)、四聚物染色/多色熒光激活的細(xì)胞分選(FACS)分析技術(shù)、酶聯(lián)免疫斑點(ELISPOT)試驗和<'51>鉻釋放試驗揭示在HLA-A2陽性的allo-SCT治療后的CML患者和健康獻血員中存在來源于透明質(zhì)酸介導(dǎo)的細(xì)胞游走受體(RHAMM)的R3肽(氨基酸序列為ILSLELMKL，一種

3、來源于白血病相關(guān)抗原RHAMM/CD168的T細(xì)胞表位肽)的特異性效應(yīng)性CD8+T細(xì)胞，而且來自于健康獻血員和allo～SCT后的CML病人的R3肽特異性的CD8+T細(xì)胞可以在體外進行擴增，并能有效殺傷HLA-A2陽性表達(dá)的CML祖細(xì)胞。其次，經(jīng)過MLPC，使用四聚物染色/FACS分析技術(shù)、ELISPOT和<'51>鉻釋放試驗評價了伊馬替尼對來自于健康獻血員和allo-SCT后的CML病人的CD8+T淋巴細(xì)胞的影響以及經(jīng)抗-CD3和CD

4、8抗體刺激三天后的CD4+CD25+Tregs的影響。在1到25μM劑量范圍之內(nèi)，伊馬替尼呈劑量依賴性地抑制R3肽特異性的CD8+T淋巴細(xì)胞增殖和功能激活。這種特異性的CD8+T淋巴細(xì)胞釋放干擾素(IFN)-γ和顆粒酶B(Gzm-B)功能被顯著性地抑制。這種T細(xì)胞為具有CD8+HLA-A2/R3四聚物+WT-1四聚物-CD45RA+C27-CD28-CCR7-表型特征的效應(yīng)性T細(xì)胞。它們具有溶解R3肽標(biāo)記的T2細(xì)胞和CD34+CML祖細(xì)