MSCs、NSCs及其分化的超微結構和免疫組化研究.pdf

1、　　目的：建立骨髓間充質干細胞和神經干細胞體外定向誘導模型并鑒定跨胚層分化可能性為其更廣泛的應用提供理論基礎。 方法：選用雄性鼠股骨、孕齡16天的胎鼠腦進行MSCs、NSCs體外分離、培養(yǎng)及傳代。分為3大組：MSCs培養(yǎng)誘導組(分為誘導7天組，誘導14天組)；MSCs對照組(培養(yǎng)未誘導14天組)；NSCs組(分為干細胞組，誘導7天組，誘導14天組)分別光鏡觀察細胞形態(tài)學變化，除了NSCs干細胞組分離固定后電鏡觀察外，MSCs對照

2、組未誘導14天后，其余各組在誘導7、14天后固定進行免疫組織化學染色及電鏡觀察。　　結論：1、MSCs誘導組NF、MAP2、anti-noradrenaline、anti-dopamine、anti-γ-aminobutyrieacid、anti-acetylcholine均呈陽性表達。電鏡觀察：少數(shù)細胞有突起形成和“突觸樣結構”/緊密聯(lián)結，但其中分泌小泡發(fā)育不完全，表明MSCs在短期體外誘導環(huán)境下可能向神經元方向分化?！　?、NS

3、Cs誘導組NF、MAP2、anti-noradrenaline、anti-dopamine、anti-γ-aminobutyricacid、anti-acetylcholine均呈陽性表達。電鏡觀察：出現(xiàn)明顯的分化趨向，胞漿明顯增多，細胞突起細長，其中含有大量神經微絲(中等微絲)，胞漿中含有大量內分泌(神經)顆粒，可見有髓鞘樣結構，線粒體有典型發(fā)育結構。表明NSCs在體外誘導環(huán)境下向神經元方向分化良好。　　3、本實驗的結果進一步證明N