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
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文檔簡介
1、研究背景與目的:我國是食管癌的高發(fā)區(qū),發(fā)病年齡多在40歲以上。食管癌是我國重要的消化系統(tǒng)惡性腫瘤,死亡率在惡性腫瘤中居于前列。食管癌綜合治療的效果目前仍不理想。術后5年生存率低于30%。然而早期食管癌幾乎可以完全治愈,有資料顯示術后5年生存率高達90%。因此,食管癌的早期診斷,對于改善患者的預后具有極其重要的意義。然而,現有的診斷技術和方法,在食管癌的早期診斷方面均不能令人滿意。類似于吞咽輕度哽噎感、胸骨后悶脹不適等早期癥狀并不典型。拉
2、網細胞學檢查是在高發(fā)區(qū)大面積普查的一項有效方法,并可應用于臨床診斷,早期癌的發(fā)現率可達80%~91%。但病人自覺痛苦,難以接受。內鏡檢查、X線鋇餐造影檢查、放射性同位素檢查以及CT、MRI、PET(正電子發(fā)射斷層顯像)、EUS(食管內窺鏡超聲檢查)、腫瘤標志物檢測等各有優(yōu)缺點。但總體來說,效果并不理想。往往發(fā)現時,患者已屆中晚期,預后及生活質量不佳。因此,尋找一種高度敏感、特異的診斷早期食管癌的方法成為目前臨床的迫切需要。差異蛋白質組學
3、的發(fā)展為腫瘤的研究提供了新的思維方式。腫瘤細胞的病理發(fā)展過程中,必然會產生和正常人不一樣的蛋白質組,如果能將這種蛋白質組的差別正確地進行分析,勢必能夠尋找到一種新的診斷腫瘤的方法。表面增強激光解析電離飛行時間質譜(SELDI-TOF-MS)技術是近年發(fā)展起來的一種蛋白組學研究方法。以這一技術為基礎開發(fā)的蛋白質芯片可以非特異性或特異性地結合被測樣本中的各種蛋白質,當在質譜儀中受激光轟擊時,各種結合的蛋白質會被激發(fā)而形成氣化離子,由于不同質
4、荷比的離子在電場中飛行時間長短不一,因此接收裝置可根據蛋白質質荷比的不同及量的多寡直觀地用位置、強弱不周的峰表現出來,進而形成圖譜來分析。利用這種技術可對血清、尿液、細胞裂解液等生物樣品直接進行檢測,且具有高靈敏度及高通量性的特點,能基本反映被檢樣本中蛋白質的全貌,進而同時找到多個蛋白質標志物,為早期診斷、預后估計、復發(fā)或轉移的監(jiān)測提供了可能。本研究旨在利用Ciphergen公司的蛋白質芯片飛行時間質譜儀系統(tǒng),選擇銅離子蛋白芯片,對早期
5、食管鱗癌和正常人血清差異表達蛋白進行分析,探討建立可用于診斷早期食管癌的分類模型。 方法:采用美國Ciphergen公司的IMAC30芯片和表面增強激光解析電離飛行時間質譜儀,檢測51例早期食管癌和56例正常人的血清蛋白質譜。將獲得的蛋白質譜采用Ciphergen公司的Biomarker Wizard和Biomarker Pattern軟件分析。通過交叉驗證建立起診斷早期食管癌的分類樹模型,并另將含有56例正常人、43例早期食管
6、癌、22例食管良性病、23例癌前疾病以及54例中晚期食管癌的驗證組共198例對此模型進行盲法驗證。 結果:對51例早期食管癌患者和56例正常人血清蛋白進行分析,結果發(fā)現共有25個蛋白表達量存在統(tǒng)計學差異,且此25個差異蛋白在早期食管癌患者血清中含量均低于正常人;通過Biomarker Pattern軟件進行分析組合,以其中5個蛋白(質荷比分別為4616.05、6336.80、7769.85、6113.94、15121.1)組成了
7、最佳分類樹模型,分組正確率達到98.04%,特異性為100%。將包括早期食管癌43例、食管息肉22例、癌前疾病23例、中晚期食管癌54例、正常人56例的驗證組對此模型進行盲法驗證。結果該模型分類早期食管癌的敏感性為83.72%、特異性為96.04%。對于正常人、食管息肉、癌前疾病、中晚期食管癌各組的特異性分別為100%、86.36%、95.65%、88.89%。 結論:早期食管癌患者與正常人血清中有25個蛋白含量差異顯著。且早期
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