糖尿病大鼠腦缺血再灌注后GLUT1和GLUT3蛋白表達(dá)變化.pdf

1、目的： 糖尿病心腦血管病變是糖尿病的主要死亡原因之一，而糖尿病腦血管病變以腦栓塞為主。目前在糖尿病腦卒中的治療中，有關(guān)血糖控制的標(biāo)準(zhǔn)一直存在爭(zhēng)議。葡萄糖是細(xì)胞進(jìn)行糖代謝及產(chǎn)生能量的重要前提，這一過程是在葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體（glucose transporter，GLUT）介導(dǎo)下完成的。在腦組織中分布的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體主要是GLUT1和GLUT3。有研究表明，腦缺血時(shí)，GLUT1、GLUT3在缺血半影區(qū)的表達(dá)上調(diào)。而慢性高血糖可引起大鼠大腦

2、中GLUT1和GLUT3蛋白表達(dá)降調(diào)節(jié)。腦缺血時(shí)腦組織損傷程度主要取決于缺血半暗帶的功能恢復(fù)情況。但是糖尿病合并腦梗塞時(shí)，缺血半暗帶內(nèi)GLUT1和GLUT3是否存在代償性變化，是否與血糖水平有關(guān)，還不清楚。為此，我們利用糖尿病大鼠腦缺血再灌注模型，探討在不同血糖水平、不同再灌注時(shí)間下腦缺血半暗帶GLUT1、GLUT3蛋白的表達(dá)變化，進(jìn)而評(píng)價(jià)糖尿病合并腦梗塞時(shí)腦梗塞體積及血糖水平和GLUT1、GLUT3表達(dá)水平的關(guān)系，為臨床糖尿病合并腦梗

3、塞治療找出合適的血糖閾作為血糖控制目標(biāo)提供理論依據(jù)． 材料與方法： 健康雄性Wistar大鼠220只，體重180-220g。隨機(jī)選出50只作為正常對(duì)照組（NC組），另外170只采用鏈脲佐菌素（STZ）溶液腹腔一次性注射建立糖尿病模型，確定成模后隨機(jī)分為3組：糖尿病血糖未控制組（DM1組）、糖尿病血糖控制一般組（DM2組）和糖尿病血糖控制良好組（DM3組），每組55只。利用皮下注射魚精蛋白鋅胰島素（PZI）將DM1、DM2

4、、DM3組血糖控制在>16．7mmol/L、10．0～14．0mmol/L、6．0～8．0mmol/L三個(gè)水平。標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)6周，將成模后（成模165只）體重在250～330g的糖尿病大鼠DMIMCAO組、DM2MCAO組、DM3MCAO組各50只采用改良Longa線栓法進(jìn)一步制作腦缺血-再灌注損傷模型（MCAO/R）。另選擇體重相近的正常雄性大鼠50只作為對(duì)照組NCMCAO組。四組均設(shè)置假手術(shù)亞組（每組各10只）。四組大鼠在缺血后1．5h

5、再灌注3h、12h、24h、72h四個(gè)時(shí)點(diǎn)分別斷頭取腦（每個(gè)時(shí)點(diǎn)各10只），采用Western Blot方法檢測(cè)大鼠腦缺血半暗帶區(qū)GLUT1和GLUT3蛋白表達(dá)水平。全部數(shù)據(jù)采用SPSS11．0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，所有計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組各指標(biāo)各時(shí)間點(diǎn)與假手術(shù)組的比較采用方差分析，組間比較采用SNK-q檢驗(yàn)，取α=0．05。 結(jié)果： 1．實(shí)驗(yàn)期間糖尿病大鼠體重明顯低于正常對(duì)照組體重（P<0．01），而血

6、糖則顯著高于NC組（P<0．01）。 2. 正常對(duì)照組大鼠假手術(shù)亞組GLUT1蛋白和GLUT3蛋白表達(dá)均高于糖尿病組的假手術(shù)亞組（P均<0．01）。 3．各組大鼠腦缺血半暗帶區(qū)GLUT1蛋白表達(dá)自缺血再灌注后3h開始升高，24h達(dá)到高峰，72h時(shí)仍高于相應(yīng)假手術(shù)亞組，DMIMCAO組、DM2MCAO組、DM3MCAO組GLUT1蛋白表達(dá)強(qiáng)度在相應(yīng)各缺血再灌注時(shí)點(diǎn)均不及NCMCAO組（P均<0．01）。各組大鼠GLUT3蛋

7、白表達(dá)變化呈現(xiàn)與GLUT1相同的變化趨勢(shì)。 4．與相應(yīng)假手術(shù)亞組比較，整個(gè)過程中各組大鼠腦缺血半暗帶GLUT1蛋白上調(diào)幅度均高于GLUT3蛋白，以缺血再灌注24h時(shí)最為顯著。 結(jié)論： 1．腦缺血時(shí)GLUT1、GLUT3蛋白表達(dá)升調(diào)節(jié)是機(jī)體對(duì)腦缺血損傷的一種保護(hù)機(jī)制。 2．四組大鼠腦缺血半暗帶區(qū)GLUT1蛋白上調(diào)幅度均高于GLUT3，提示GLUT1比GLUT3對(duì)腦缺血再灌注損傷更敏感、反應(yīng)更快。 3