TGF-β1和NCAM在大鼠腦缺血再灌注后的表達及藥物干預.pdf

1、目的:1、探討TGF-β1在大鼠腦缺血再灌注后不同時間的表達變化及芹菜素和地塞米松對其表達的影響。
　　 2、探討NCAM在大鼠腦缺血再灌注后不同時間的表達變化及芹菜素和地塞米松對其表達的影響。
　　 方法:采用改良線栓法建立大鼠腦缺血(2h)及再灌注后不同時間損傷模型。動物隨機分為假手術組(Sham-operated,S,n=7)、模型組(Model,M,n=28)、芹菜素組(Apigenin,A,n=28)和地塞米松

2、組(Dexamethasone,D,n=28)。M組、A組和D組按再灌注時間不同又分為再灌注6h組(M6h,A6h,D6h,n=7)、24h組(M24h,A24h,D24h,n=7)、72h組(M72h,A72h,D72h,n=7)、7d組(M7d,A7d,D7d,n=7),各4小組,共13小組。A組于再灌注同時及其后的每24h腹腔注射11.6×10 M芹菜素溶液25mg/kg(0.8ml/100g),D組于再灌注同時及其后的每24h腹

3、腔注射地塞米松溶液5mg/kg(0.8ml/100g),S組和M組在相同的時間注射等體積生理鹽水。各組動物麻醉清醒后均給予神經(jīng)行為學評分。每組大鼠各6只觀察至規(guī)定時間經(jīng)心臟灌注固定后用免疫組化法分別檢測TGF-β1和NCAM表達、光鏡觀察細胞形態(tài)學變化。每組1只大鼠經(jīng)心臟灌注后做腦組織切片,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色觀察腦梗死灶。
　　 結果:
　　 1、神經(jīng)行為學評分:M組在7d神經(jīng)行為學評分較6h有減

4、小(P<0.05)；A組在7d神經(jīng)行為學評分較6h、24h有減小(P<0.05),在72h神經(jīng)行為學評分低于M72h組(P<0.05)；D組在7d神經(jīng)行為學評分較6h、24h有減小(P<0.05)；余各相應時間點間比較無統(tǒng)計學意義。
　　 2、腦組織切片TTC染色:假手術組腦片均紅染,未見白色梗死灶形成；模型6h組可見較大的尾殼核和額顳頂葉皮層白色梗死灶的融合；地塞米松6h組及芹菜素6h組的梗死灶較相應時間的模型組均有不同程度的

5、減小,主要表現(xiàn)在皮層。
　　 3、大鼠腦組織細胞結構變化:M組缺血側皮層神經(jīng)細胞結構模糊、胞體腫脹、胞漿水腫,出現(xiàn)不同程度的核深染、細胞皺縮,出現(xiàn)明顯空泡化,M72h組病變最明顯。A組和D組較相對應時間的M組組織水腫有減輕。
　　 4、大鼠腦組織TGF-β1的表達:M組、A組和D組各時間點都有TGF-β1的表達增加,其表達與S組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。術后各組各時間點間比較,24h、72h組表達均明顯增加(P<

6、0.01),7d仍有大量表達。A組和D組較同期M組表達均有明顯增加(P<0.01或P<0.05)。A組和D組相對應時間組之間表達量無明顯差異。
　　 5、大鼠腦組織NCAM的表達:M組、A組和D組各時間點都有NCAM的表達增加,其表達與S組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。術后各組各時間點間比較,72h組表達最明顯(P<0.01或P<0.05),7d仍有大量表達。A組各時間組較同期M組表達均有明顯增加(P<0.01)。D組在6h

7、、24h組表達較同期M組表達明顯增加(P<0.01),在72h、7d組表達量與同期M組比較無統(tǒng)計學意義。
　　 結論:
　　 1、芹菜素與地塞米松均可增加腦缺血再灌注后TGF-β1的表達,提示芹菜素和地塞米松可能通過TGF-β1促進腦組織損傷的修復,達到神經(jīng)損傷的保護作用。
　　 2、芹菜素與地塞米松均可增加腦缺血再灌注后NCAM的表達,提示芹菜素與地塞米松可能通過NCAM而達到促進腦組織損傷后神經(jīng)細胞修復和再生