脂肪酶產(chǎn)生菌的選育及其催化生物柴油的研究.pdf

1、隨著石油等傳統(tǒng)礦產(chǎn)能源的日益枯竭以及燃燒礦產(chǎn)燃料產(chǎn)生的環(huán)境污染問題日益嚴(yán)重,迫使人們開始尋找清潔、可持續(xù)利用的替代能源,生物柴油作為可再生清潔能源受到日益廣泛關(guān)注。用脂肪酶法催化合成生物柴油可以解決化學(xué)合成法制備生物柴油的問題,已經(jīng)受到越來越多的關(guān)注。本文主要對(duì)脂肪酶產(chǎn)生菌進(jìn)行了篩選,對(duì)產(chǎn)酶發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化,對(duì)酶法催化蓖麻油制備生物柴油的工藝進(jìn)行了初步研究。
　　 以蓖麻油為唯一碳源,經(jīng)平板初篩、搖瓶復(fù)篩及催化轉(zhuǎn)酯反應(yīng)生產(chǎn)生物

2、柴油的試驗(yàn),從蓖麻生長(zhǎng)的土壤中篩選到一株產(chǎn)生的脂肪酶可以有效催化蓖麻油轉(zhuǎn)酯反應(yīng)的細(xì)菌H-4,根據(jù)菌體的形態(tài)顯微觀察和生理生化鑒定,初步鑒定該菌株為假單胞菌(Pseudomonas)。
　　 H-4菌株產(chǎn)生的脂肪酶基本酶學(xué)性質(zhì)研究表明:最適作用pH為8.0,最適作用溫度為40℃。
　　 H-4菌株發(fā)酵產(chǎn)酶條件進(jìn)行優(yōu)化后的結(jié)果為:蔗糖濃度0.6％、豆粉濃度1.5％、(NH4)2SO4濃度0.3％、檸檬酸鈉濃度0.1.％、Mg

3、SO4·7H2O濃度0.02％、K2HPO4濃度0.4％、KH2PO4濃度0.6％、起始pH為8.5、接種量5％、培養(yǎng)溫度30℃、搖床轉(zhuǎn)速220r/min、培養(yǎng)60h,測(cè)定酶活力為114IU/mL。
　　 H-4菌株發(fā)酵產(chǎn)生的脂肪酶催化蓖麻油制備生物柴油的較優(yōu)工藝條件為:以5mL正己烷做溶劑,甲醇1.092g蓖麻油3.408g,(醇油摩爾比為理論反應(yīng)比例3:1),6000r/min的條件下用組織搗碎機(jī)乳化預(yù)處理蓖麻油7min,甲