先天性白內障住院病人中TORCH病原檢測表達意義的評價性研究.pdf

1、研究背景:
　　先天性白內障是一類嚴重影響兒童視覺健康的疾病，包括兩種類型，一種是出生后即存在晶狀體的渾濁，另一種是出生后1年內再形成的晶狀體渾濁。大多數(shù)患兒需要手術治療，由于兒童生長發(fā)育的特殊性，手術后易發(fā)各種并發(fā)癥，在其特殊的視覺發(fā)育過程中，視力及視功能均受不同程度影響，成為眼科臨床治療的難題。因此，探究其發(fā)病原因和機制，以采取有效防范措施，降低其發(fā)病率，是眼科學的重要課題。近年來國內外大多數(shù)研究者認為，約有1/3的先天性白內

2、障與遺傳因素有關，還有1/3病例的發(fā)病原因和環(huán)境因素特別是病毒（風疹、麻疹、水痘、單純皰疹等）有關，另有1/3為機制不明的散發(fā)病例。小兒眼科學者普遍認為在胚胎形成過程中，諸如病毒，寄生蟲等病原體的感染，對先天性白內障的發(fā)病起著重要的影響。病毒作為基因突變的一個重要的誘發(fā)病原，可能導致基因的位移、重排或缺失等改變，突變結果產生致白內障基因，特別在是胚胎形成期傳遞非正?；蛐畔?，對先天性白內障的形成可能起著重要的作用。細胞內寄生的弓形蟲也會

3、影響正常巨噬細胞的功能，使宿主細胞產生凋亡，引發(fā)眼內炎癥導致白內障的發(fā)生。TORCH病原抗體檢測作為巨細胞病毒(CMV)、單純皰疹Ⅰ(HSVⅠ)和Ⅱ型病毒(HSVⅡ)、風疹病毒(RV)和弓形蟲(TOX)等五類病原的抗體IgG及IgM測定，可以反映患兒是否在胚胎期曾經遭受過病毒和寄生蟲的侵襲以及出生后的獲得性感染。我院常規(guī)開展門診相關患病兒童和住院白內障及非白內障兒童的酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA法）檢測TORCH病原抗體。本研究通過白內

4、障組與非白內障組住院或門診患兒檢測出的TORCH抗體陽性率比較，試圖尋找TORCH病原感染與白內障發(fā)生的相關性，根據(jù)統(tǒng)計的結果來評價現(xiàn)行的TORCH檢測實際臨床意義，進一步發(fā)現(xiàn)病毒和寄生蟲因素在先天性白內障發(fā)生中所占的病因學份額，為進一步研究先天性白內障的發(fā)病機制提供更加合適的研究方向和發(fā)現(xiàn)更多的證據(jù)。
　　研究目的:
　　回顧性分析總結來自2006年5月～2013年9月間浙江大學醫(yī)學院附屬兒童醫(yī)院，有完整血清TORCH病原

5、抗體（包括CMV、HSVⅠ和HSVⅡ、RV和TOX等五類病原）IgG及IgM檢測記錄的69例先天性白內障患兒為研究組，與隨機抽樣的同期非白內障住院患兒289例和新生兒151例進行平行比較，并與2010年10月～2013年9月門診11963例有相關抗體檢測記錄的就診患兒進行橫向比較，研究探討上述病毒和寄生蟲感染與先天性白內障發(fā)生的相關性，評價在先天性白內障患兒中進行TORCH檢測的臨床意義，發(fā)現(xiàn)新的現(xiàn)象，探討更有價值的研究方法。
　

6、　研究對象與方法:
　　1.研究對象
　　1.1白內障組
　　明確診斷的先天性白內障兒童69例，均為入住兒童醫(yī)院需要手術治療的患兒，男33例，女36例，年齡1個月9天～11歲6個月，平均年齡19.57±22.164個月，其中單純白內障的患兒36例，合并有眼球震顫、心臟病等其他系統(tǒng)疾病的33例;單眼白內障患兒32例，雙眼白內障患兒37例。所有患兒均有胸片，心電圖，雙眼、心臟及腹部B型超聲等檢查，人類免疫缺陷病毒(HIV)

7、及梅毒螺旋體特異性被動血凝試驗（TPHA）檢測陰性。已排除有明確家族白內障遺傳病史的病例。
　　1.2對照組兩組
　　1.2.1平行對照組:
　　隨機抽樣的同期非白內障住院患兒289例，其中男143例，女146例，年齡29天～13歲7個月，平均年齡17.71±27.731個月和新生兒住院患兒151例，男78例，女73例，年齡1天～28天，其中新生兒患兒有無同時伴發(fā)先天性白內障情況不明確?；純杭膊≈邪ㄓ邢忍煨孕呐K病、先

8、天腦發(fā)育不良、癲癇、腎炎腎病、肝功能異常、病毒性腦炎、白血病、呼吸道及泌尿道感染等各類內科外科病種。未發(fā)現(xiàn)明確的家族遺傳病史，有HIV和TPHA檢測記錄的病例均為陰性結果。
　　1.2.2橫向對照組:
　　作為接近普通人群組趨勢的對照，取至2010年10月～2013年9月門診有相關電腦存檔檢測記錄的11963人次就診患兒，男7243例，女4720例，年齡1天～16歲11個月。年齡呈前兩組類似的偏態(tài)分布。有外傷、呼吸系統(tǒng)感染、

9、腎病、腦炎、腫瘤、先天性心臟病、先天畸形、內分泌相關代謝性疾病等各科病種。家族遺傳病史和HIV、TPHA檢測記錄不明。
　　所有病例檢測報告均為TORCH檢測陽性或陰性結果，刪除所有報告為陽性可疑的病例。所有住院病歷均有家長簽署的知情同意書。
　　2.研究方法
　　采用回顧性設計，分組隨機配對研究的方法。
　　2.1臨床檢查:
　　所有入選白內障均行常規(guī)眼部檢查，包括眼前段裂隙燈檢查、眼壓等檢查，托品酰胺滴

10、眼液散瞳白內障形態(tài)、間接眼底鏡眼底檢查，雙眼、心臟及腹部B型超聲、胸片、心電圖等檢查。平行對照組中非新生兒患兒查詢病歷未見眼部明顯異常;新生兒因年齡太小，新生兒科醫(yī)生體檢困難等原因，無詳細眼科檢查記錄，故有無伴發(fā)白內障情況不明確。橫向對照組沒有眼部專科檢查記錄，只截取門診電腦記錄診斷。
　　2.2實驗室檢查:
　　2.2.1標本采集
　　所有受檢對象均采集清晨空腹外周靜脈血1-2毫升，室溫靜置不超過8小時，預計超過8小

11、時才能試驗的樣本則采集后即刻存放在2-10℃冰箱中，預計超過24小時后才能試驗的樣本則采集后即刻于-20℃冰箱保存，所有樣本均在二天內集中完成檢測。成批檢測。
　　2.2.2測定方法
　　采用ELISA法測定血清TORCH抗體IgG和IgM。試劑盒購自美國TrinityBiotech Plc公司，所有受檢者均用同一產地公司試劑，具體操作步驟嚴格按照說明書進行。
　　2.3統(tǒng)計學分析
　　所有統(tǒng)計數(shù)據(jù)使用SPSS1

12、9.0軟件包計算，計數(shù)資料以百分數(shù)、構成比表示，計量資料以均數(shù)±標準差表示。年齡采用方差方程Levene檢驗、均值方程的t檢驗。性別構成以及比較白內障組和對照組的抗體表達抗性率差異采用完全隨機設計四格表資料的x2檢驗。
　　研究結果:
　　1.比較白內障組、平行對照非新生兒組的年齡、性別構成等差異未見有統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　2.白內障組血清HSVⅡ-IgG陽性率為7.20％、IgM陽性率為1.40％，平行對

13、照的非新生兒組為2.10％、1.40％，兩組IgG及IgM陽性率差異未見有統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　3.白內障組HSVⅠ-IgG陽性率為10.10％、IgM陽性率為1.40％，平行對照的非新生兒組為9.00％和0.30％，兩組IgG及IgM陽性率差異未見有統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　4.白內障組RV-IgG陽性率為5.80％、IgM陽性率為1.40％，平行對照的非新生兒組為4.80％和1.40％，兩組IgG及I

14、gM陽性率差異未見有統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　5.白內障組TOX-IgG陽性率為0.00％、IgM陽性率為0.00％，平行對照的非新生兒組為0.30％和0.30％，兩組IgG及IgM陽性率差異未見有統(tǒng)計學意義（p＞0.05）。
　　6.白內障組CMV-IgG陽性率為23.20％、IgM陽性率為14.50％，平行對照的非新生兒組為23.50％和14.20％，兩組IgG及IgM陽性率差異未見有統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。

15、
　　7.非新生兒中平行對照組和和橫向對照組的比較，HSVⅠ-IgG、HSVⅡ-IgG、TOX-IgG和IgM陽性率差異未見統(tǒng)計學意義。RV-IgM、CMV-IgM陽性率差異未見統(tǒng)計學意義。但RV-IgG、CMV-IgG陽性率差異有統(tǒng)計學意義，平行對照組較高。
　　8.白內障組與橫向對照非新生兒組的比較中RV-IgG、CMV-IgG陽性率差異未見統(tǒng)計學意義，但HSVⅡ4gG的陽性率差異卻有統(tǒng)計學意義，白內障組較高。其他TOR

16、CH抗體和平行對照組的結果相似，各抗體陽性率差異無統(tǒng)計學意義。
　　9.新生兒和非新生兒的檢測結果比較，則發(fā)現(xiàn)HSVⅡ-IgG、HSVⅠ-IgG、CMV-IgG和HSVⅡ-IgM、HSVⅠ-IgM、CMV-IgM陽性率差異均有統(tǒng)計學意義，三種病毒的IgG抗體新生兒明顯增高而IgM抗體陽性率低與非新生兒;TOX-IgG新生兒較高但TOX-IgM陽性率沒有區(qū)別;RV-IgM非新生兒陽性率較高而RV-IgG未見差異有統(tǒng)計學意義。

17、　　10.性別之間的陽性率有一些區(qū)別，表現(xiàn)為HSVⅡ-IgG、 HSVⅠ-IgG、CMV-IgG女孩較高但HSVⅡ-IgM、 HSVⅠ-IgM、CMV-IgM陽性率沒有差別，差異有統(tǒng)計學意義。
　　11.單眼或雙眼發(fā)病的先天性自內障之間，以及單純性白內障和伴有其他系統(tǒng)疾病的患兒之間TORCH抗體的檢測陽性率差異未見統(tǒng)計學意義的結果。
　　研究結論:
　　1.本研究發(fā)現(xiàn)先天性白內障患兒中HSVⅡ-IgG抗體檢測出陽性率較

18、高，提出:除風疹病毒外，HSV也可能是導致先天性白內障的TORCH歸屬病毒。
　　2.研究發(fā)現(xiàn)先天性白內障兒童血清TORCH陽性率與其他不良妊娠相關疾病的結果相近，證實了研究組先天性白內障兒童也應是不良妊娠疾病中的一個重要組成部分，其發(fā)生可能與TORCH病原感染有關。
　　3.本研究中新生兒患兒HSVⅡ-IgG、 HSVⅠ-IgG、CMV-IgG、TOX-IgG抗體檢測陽性率較高，而代表出生后自身獲得性感染而出現(xiàn)的HSVⅡ-

19、IgM、HSVⅠ-IgM、CMV-IgM抗體卻較低，提示該類IgG抗體多數(shù)為母源性抗體的可能較大。也提示在新生兒早期篩查發(fā)現(xiàn)先天性白內障并對其進行TORCH檢測，更能發(fā)現(xiàn)與宮內感染相關的流行病學線索。因此，本研究在先天性白內障的病因學研究中有向導性作用。
　　4.研究中還發(fā)現(xiàn)性別間存在著差異，女性患兒HSVⅡ、HSVⅠ及CMV的IgG抗體表達較高，提示這些抗體是否有某些特殊的生物學作用機制有待研究。
　　5.對單眼或雙眼白內

20、障發(fā)生率的在TORCH表達的對照中，研究顯示無相關性，未能支持早期學者認為先天性白內障單側與雙側發(fā)病有某些不同病因的觀點。單純性白內障和伴有其他系統(tǒng)疾病的患兒之間沒有差異，考慮病毒在同源組織中的致病過程可能有類似的機制過程。
　　6.血清TORCH的檢測簡便，對高危人群進行擇期和選擇性的檢測，特別是在新生兒早期篩查中發(fā)現(xiàn)出的先天性白內障患兒中進行檢測，更能發(fā)現(xiàn)流行病學的線索，可作為兒童先天性白內障的病因學檢測指標。進一步結合調查孕