大麻素Ⅱ型受體激動(dòng)劑促進(jìn)小鼠心肌梗死后的內(nèi)源性心肌再生.pdf

1、背景：
　　冠心病是我國(guó)的常見病和多發(fā)病,并嚴(yán)重危害著人們的健康。針對(duì)冠心病的傳統(tǒng)治療包括鈣受體阻滯劑、β2受體阻滯劑、溶栓、PCI、以及外科心臟移植等?，F(xiàn)有藥物治療及血管再通術(shù)雖然能夠在一定程度上改善患者的癥狀,但是往往不能從根本上逆轉(zhuǎn)壞死心肌導(dǎo)致終末期心衰的結(jié)局,而外科的心臟移植由于存在供體來源少、手術(shù)費(fèi)用昂貴的難題難以廣泛開展。近20年來干細(xì)胞移植替代壞死心肌成為冠心病研究熱點(diǎn)。雖然大量有關(guān)外源性干細(xì)胞移植的基礎(chǔ)和臨床研究取

2、得一些進(jìn)展,但是外源性干細(xì)胞移植仍然無法克服體外擴(kuò)增程序復(fù)雜,移植后細(xì)胞存活率低等瓶頸。近期研究表明心臟存在原位干/祖細(xì)胞以及心臟內(nèi)源性再生。但是心臟干/祖細(xì)胞數(shù)目少,并且其增值和活化受到多種因素的影響。大麻素受體主要包括Ⅰ型受體和Ⅱ受體。已有研究表明激活大麻素Ⅱ受體不僅具有抗炎抗氧化應(yīng)激以及抗凋亡的作用,而且能夠促進(jìn)心臟細(xì)胞的增殖。更令人感興趣的是,大麻素Ⅱ受體激動(dòng)劑被報(bào)道參與造血干/祖細(xì)胞的動(dòng)員和遷移,以及能促進(jìn)在體和離體狀態(tài)下神經(jīng)

3、干/祖細(xì)胞增殖。因此,我們提出科學(xué)假說:大麻素Ⅱ受體激動(dòng)劑能夠原位激活心臟干/祖細(xì)胞并促進(jìn)其增殖,從而發(fā)揮心臟內(nèi)源性再生的作用。
　　目的：
　　本研究旨在探討CB2受體激活能否誘導(dǎo)心梗后心臟原位干/祖細(xì)胞增殖從而促進(jìn)心臟內(nèi)源性再生并探討相關(guān)機(jī)制。
　　方法：
　　1.8周齡的雄性C57BL/6小鼠被隨機(jī)分為4組:(1)假手術(shù)組(sham);(2)心梗+PBS組(MI);(3)MI+AM1241(CB2受體激動(dòng)劑

4、)組;(4)MI+AM1241+wortmannin(PI3K抑制劑)組。將C57BL/6小鼠心臟左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎建立心梗模型。2.采用小動(dòng)物超聲系統(tǒng)觀察小鼠左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)的變化;馬松染色觀察心梗后心臟纖維化水平;3.免疫熒光染色觀察心梗周邊區(qū)表達(dá)c-kit、Sca-1的陽性細(xì)胞數(shù)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定心梗周邊區(qū)c-kit、Sca-1和MDR1的表達(dá)水平。4.ELISA檢測(cè)血漿中MDA、TNF-α和IL-6的水平;Wes

5、tern blot檢測(cè)p-Akt,HO-1和Nrf-2蛋白的表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　1.與心梗組相比,AM1241干預(yù)可提高小鼠心臟左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF),同時(shí)減輕心肌纖維化的程度。2.免疫熒光染色結(jié)果顯示,心梗+AM1241組,C-kit、Sca-1染色的陽性細(xì)胞數(shù)量明顯高于心梗組(p<0.05)。3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,(MI+1241)組c-kit和Sca-1的基因表達(dá)水平明顯高于MI組(p<0.05)。

6、4.AM1241還可降低心梗后血漿中MDA、TNF-α和IL-6水平(p<0.05)。Western blot結(jié)果提示,AM1241可明顯增加胞漿中p-Akt和HO-1表達(dá)(p<0.05),同時(shí)促進(jìn)胞核中Nrf-2的表達(dá)水平(p<0.05)。然而,PI3K抑制劑wortmannin可阻斷AM1241的上述作用。
　　結(jié)論：
　　CB2受體激動(dòng)劑可改善心臟功能和心肌重塑,促進(jìn)心梗后心肌內(nèi)源性再生,其機(jī)制可能是CB2激活后通過調(diào)