版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、目的:體外誘導(dǎo)NSCs并使NSCs分化為NPCs,觀察NSCs及NPCs在發(fā)育過(guò)程中NMDARs(NMDA受體)介導(dǎo)的全細(xì)胞電流的變化情況,以及Na+、Ca2+電流出現(xiàn)的先后順序,為作用于NMDARs促進(jìn)NSCs分化為NPCs的藥物提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:應(yīng)用細(xì)胞免疫化學(xué)方法觀察神經(jīng)干細(xì)胞Nestin以及分化1d、3d、7d、9dNPCs的βⅢ-tubulin表達(dá)情況。應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)在-60mv鉗制電壓下記錄NS
2、Cs和NPCs電流。將NSCs和NPCs和分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組觀察NSCs的NMDARs介導(dǎo)的電流變化以及NPCs分化1d、3d、5d、7d、9d時(shí)NMDARs介導(dǎo)的電流變化。對(duì)照組加入無(wú)Mg2+的配制20μM CNQX(AMPA和KA受體阻斷劑)沖洗細(xì)胞20s后立即加入無(wú)Mg2+的細(xì)胞外液;實(shí)驗(yàn)組先加入用無(wú)Mg2+細(xì)胞外液配制20μM CNQX(AMPA和KA受體阻斷劑)沖洗細(xì)胞20s后立即加入用無(wú)Mg2+細(xì)胞外液配制的10μM、20μ
3、M、50μM、100μMNMDA,觀察NMDARs介導(dǎo)電流的變化情況。當(dāng)觀察Na+、Ca2+電流出現(xiàn)的先后順序時(shí),(A)全電流組:先加入用無(wú)Mg2+細(xì)胞外液配制的20μMCNQX沖洗20s后立即加入用無(wú)Mg2+細(xì)胞外液配制100μMNMDA;(B)無(wú)Na+組:先用無(wú)Mg2+的NMDG(替代等摩爾量的Na+)細(xì)胞外液配制的20uMCNQX沖洗細(xì)胞20s后立即加入無(wú)Mg2+的NMDG細(xì)胞外液配制的100μMNMDA;(C)無(wú)Ca2+組,先用
4、無(wú)Mg2+的EGTA(螯合細(xì)胞外液的Ca2+)細(xì)胞外液配制的20μMCNQX沖洗細(xì)胞20s后,加入無(wú)Mg2+的EGTA細(xì)胞外液配制的100μMNMDA;(D)無(wú)Na+、Ca2+組,先用無(wú)Mg2+的無(wú)Na+、無(wú)Ca2+細(xì)胞外液配制的CNQX20μM沖洗細(xì)胞20S,后加入用無(wú)Mg2+的無(wú)Na、無(wú)Ca2+細(xì)胞外液配制的100μM NMDA,觀察電流變化。
結(jié)果:1.免疫細(xì)胸化學(xué)方法觀察到NSCs的Nesting為陽(yáng)性,1d、7d
5、、9d的NPSs的βⅢ-tubulin為陽(yáng)性。
2.未檢測(cè)到NSCs的NMDARs介導(dǎo)電流產(chǎn)生3.在不同分化時(shí)間的NPCs中,分化1d和2d的NPCs未檢測(cè)到電流。
3.分化3d、5d、7d、9d的NPCs時(shí)對(duì)照組未檢測(cè)到電流,實(shí)驗(yàn)組檢測(cè)到電流,分化相同天數(shù)的NPCs隨劑量增加電流增大,p<0.05;加入相同、劑量的NMDA,隨著時(shí)間的進(jìn)行電流增大,p<0.05。
4.檢測(cè)分化3dNPCs的NM
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及分化過(guò)程中鉀電流的變化.pdf
- 大鼠局灶性腦缺血再灌注過(guò)程中血流、NMDA受體、M受體及NO時(shí)空變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- NMDA受體及其亞單位在大鼠NSCs增殖、分化以及腦缺血中作用的研究.pdf
- NMDA受體信號(hào)通路在暈動(dòng)癥適應(yīng)-脫適應(yīng)過(guò)程中的作用及機(jī)制.pdf
- EMMPRIN在肺癌介導(dǎo)的抑制成骨分化過(guò)程中的作用及機(jī)制研究.pdf
- Itch介導(dǎo)的PPARγ泛素化修飾在脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中的作用.pdf
- 神經(jīng)干細(xì)胞在其分化過(guò)程中bHLH基因的表達(dá)變化.pdf
- 蘆筍性別分化過(guò)程中內(nèi)源激素和多胺變化及差異蛋白研究.pdf
- FIP200在ATRA誘導(dǎo)NSCs自噬、分化和凋亡過(guò)程中表達(dá)的研究.pdf
- 趨化因子MCP-1對(duì)大鼠海馬區(qū)NMDA受體介導(dǎo)的興奮性突觸后電流的作用及機(jī)制.pdf
- 瘦素及其受體在再障小鼠模型發(fā)病過(guò)程中的變化及意義的研究.pdf
- 組胺及其受體對(duì)NMDA受體介導(dǎo)的神經(jīng)元毒性作用機(jī)制研究.pdf
- NMDA受體調(diào)節(jié)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞分化以及銅腙模型中的髓鞘再生過(guò)程.pdf
- 鋅對(duì)大鼠下丘神經(jīng)元上甘氨酸受體介導(dǎo)電流的調(diào)控作用.pdf
- TAZ在脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中的作用及調(diào)節(jié).pdf
- NMDA受體介導(dǎo)的脊髓缺血再灌注損傷與保護(hù).pdf
- 蠟燭燃燒過(guò)程中的變化
- 軟骨分化過(guò)程中的microRNA的功能研究.pdf
- 菊花花芽分化過(guò)程中內(nèi)源激素的變化及新型化學(xué)調(diào)控措施的篩選.pdf
- 煙堿對(duì)發(fā)育過(guò)程中海馬神經(jīng)元AMPA和NMDA受體的調(diào)制作用.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論