神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及分化過(guò)程中鉀電流的變化.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文神經(jīng)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及分化過(guò)程中鉀電流的變化姓名：張紫娟申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生理學(xué)指導(dǎo)教師：邢瑩20060525簿爨夫?qū)W2鞠6年礞圭磺究童孳妲論文禱經(jīng)手蹈囂俸，培養(yǎng)及努純過(guò)程串鉀電流鮑蹙純方法禿鼙條《牟下自掰生大鬣海馬凌談弱分離享拳縫予維縋并在體羚瑭養(yǎng)。敬麓三或第四代處于增殖期的神經(jīng)干細(xì)胞，在培養(yǎng)基中添加血清并撤除有絲分裂原，誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞。隧后，運(yùn)用免疫細(xì)胞化學(xué)染色方法檢測(cè)綱胞抗原Nestinneu∞epi氆

2、eli矗ls缸|c蘸lpfo幽)、黼囂(嘲f。璉唧ecifiee玨趣asc)及G淞P(gl主alfiberaddprotein)以評(píng)價(jià)分化細(xì)胞的類型及陽(yáng)性率；同時(shí)，運(yùn)用膜片鉗全細(xì)臌記錄方法檢渡《毒申經(jīng)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化后第ld、7d、14d、2ld的鉀電濾。結(jié)果1自新生大鼠海馬齒狀回分離的神經(jīng)干細(xì)胞數(shù)最較少，呈圓形，雜質(zhì)較多。黌餞培養(yǎng)奎第三代(終2l硅左右)醒覓培養(yǎng)渡中形成較大懿神經(jīng)壤，雜質(zhì)已纂本消除。細(xì)胞免疫化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)千細(xì)胞標(biāo)恚性

3、蛋白Nestin在原代及傳代培養(yǎng)的神綴球細(xì)胞均有液達(dá)。2襻經(jīng)于細(xì)胞經(jīng)誘簿分促ld愛(ài)，大多數(shù)懸浮漿生長(zhǎng)靜享?xiàng)椊?jīng)球囂始鬟占壁，并有細(xì)胞爬如。誘導(dǎo)分仡廂的7d，14d，2ld，神經(jīng)球的形狀已基本消失，分化的細(xì)胞已可見(jiàn)較明顯的樹突、軸突及突觸聯(lián)系。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)恩示，誘導(dǎo)分化蓐的褥經(jīng)綴藤表達(dá)棗經(jīng)元楚表囂掭卷艇sE窩星形駁蒺綏照懿表鬣檬恚G藥謹(jǐn)。3經(jīng)誘導(dǎo)分化后的神經(jīng)干細(xì)臆，分別在第ld、7d、14d、2ld進(jìn)行全細(xì)胞膜片鉗檢測(cè)，其中，1d未檢測(cè)

4、出鉀電流，7d、14d，2ld各時(shí)間點(diǎn)鉀離子的電流密度篷，在50mV毫聰窳平下分鬟為(18留圭278)峭審囂≤13羽2。74)即內(nèi)E(3404806)∥唧F。7d與14d的鉀漱流差異無(wú)顯藩性，隨著分化時(shí)間的延長(zhǎng)，在分化培養(yǎng)2ld時(shí)鉀電流密度明顯增減，與7d及14d相比差異有鼴著性(PO05)結(jié)論，1自新生大鼠海馬齒狀嗣分離并在體外培養(yǎng)的NScs星Nestin陽(yáng)性，經(jīng)誘導(dǎo)分化后呈NsE’G黝母陽(yáng)性，表昵誘導(dǎo)后細(xì)胞趨向于分化及成熟。2羥誘導(dǎo)