以多種方法對照研究環(huán)孢菌素A與唑類藥物的體外聯(lián)合抗真菌作用.pdf

1、目的：采用棋盤法、時間-殺菌曲線法等方法，考察環(huán)孢菌素A分別與三種唑類抗真菌藥物聯(lián)合應(yīng)用時對敏感與耐藥白色念珠菌的體外抗真菌效果，并比較方法間的一致性。 方法：采用棋盤法測定免疫抑制劑環(huán)孢菌素A(CsA)與三種唑類抗真菌藥物氟康唑(FLC)、伊曲康唑(ITR)、伏立康唑(VRC)聯(lián)用48h對敏感與耐藥白色念珠菌的體外靜態(tài)抗真菌作用，結(jié)果以肉眼觀察法與OD值測定法兩種方法進行測定，肉眼觀察法所得結(jié)果用FICI法進行評價，OD值測定

2、法所得結(jié)果用FICI法、△E法與RSA法進行評價，并比較方法間的一致性；采用時間-殺菌曲線法測定并評價藥物聯(lián)用48h內(nèi)的動態(tài)抗真菌效果，結(jié)果以菌落計數(shù)法與XTT比色法進行測定，并與棋盤法所得的結(jié)果進行比較。 結(jié)果：使用棋盤法評價CsA與三種唑類藥物之間的聯(lián)合抗真菌作用時，對敏感白色念珠菌，以FICI法所得的FICI-1(以肉眼觀察法所得數(shù)據(jù)計算FICI值)中值分別為：0.50、0.50、1.00，F(xiàn)ICI-2(以O(shè)D值測定法所得

3、數(shù)據(jù)計算FICI值)中值分別為：1.00、0.50、1.00；以RSA法所得的α值中值均為0：以△E法所得的∑SYN與∑ANT中值分別為：75.6％、-86％，101％、-51％，77.9％、-31.5％。實驗結(jié)果表明，CsA與三種唑類藥物聯(lián)用時，對敏感白色念珠菌的聯(lián)合抗真菌作用不明顯，多為無關(guān)作用，但對唑類藥物有“拖尾”效應(yīng)的菌株，藥物聯(lián)用時能夠消除此效應(yīng)。不同測定、評價方法的結(jié)果不盡一致，F(xiàn)ICI-1與FICI-2法的相符率為86.

4、7％，F(xiàn)ICI-2法與RSA法、△E法，以及RSA法與△E法之間的相符率分別為93.3％、73.3％、66.7％。對于耐藥白色念珠菌，當(dāng)CsA與FLC、ITR、VRC聯(lián)合時，其FICI-1與FICI-2中值均為0.00；α中值均＞107；∑SYN與∑ANT中值分別為：1086.1％、-30.7％，1508.9％、-30.1％，712.1％、-40％。結(jié)果表明，對耐藥白色念珠菌，不同測定、評價方法所得的結(jié)果均為強協(xié)同作用。各種方法間具有良

5、好的一致性，F(xiàn)ICI-1與FICI-2法之間，F(xiàn)ICI-2法與RSA法、△E法之間的相符率均為100％。運用時間-殺菌曲線法評價CsA與唑類藥物的聯(lián)合抗真菌作用時，獲得了與棋盤法較為一致的結(jié)論。當(dāng)藥物聯(lián)合與受試菌作用48h時，對于敏感的白色念珠菌，與唑類藥物單用相比，各藥物聯(lián)用組菌落計數(shù)下降的對數(shù)平均值均小于2(XTT比色法)，分別為1.55、1.43、1.40，藥物聯(lián)合全部表現(xiàn)為無關(guān)作用；對于耐藥白色念珠菌，與唑類藥物單用相比，各藥物

6、聯(lián)用組菌落計數(shù)下降的對數(shù)平均值均大于2(XTT比色法)，藥物聯(lián)合全部表現(xiàn)為協(xié)同作用，表明CsA對唑類藥物有明顯的增敏作用。菌落計數(shù)法與XTT比色法有良好的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)r=0.9622。 結(jié)論：本研究中靜態(tài)的棋盤法與動態(tài)的殺菌曲線法均表明：對于敏感的白色念珠菌，CsA對三種唑類抗真菌藥物FLC、ITR及VRC無明顯的增敏作用，聯(lián)合作用結(jié)果多為無關(guān)作用，但對唑類藥物有“拖尾”效應(yīng)的菌株，藥物聯(lián)用時能夠消除此效應(yīng)；而對于耐藥的白色