五甲基槲皮素及胃袖狀切除術(shù)對(duì)乳鼠腹腔注射鏈脲佐菌素誘導(dǎo)2型糖尿病大鼠模型的效應(yīng)研究.pdf

1、第一部分、乳鼠腹腔注射STZ 誘導(dǎo)2 型糖尿病大鼠模型的建立
　　 目的：建立乳鼠腹腔注射STZ 誘導(dǎo)T2DM 大鼠模型并掌握其基本特點(diǎn)，為后期研究打下基礎(chǔ)。
　　 方法：于華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物飼養(yǎng)中心購(gòu)回健康SD 大鼠（160-180 g，雌性大鼠數(shù)量：雄性大鼠數(shù)量=2：1）正常飼養(yǎng)，至雌性大鼠體重達(dá)280 g 且雄性大鼠體重達(dá)350 g 左右時(shí)按照1 雄2 雌比例進(jìn)行配種，期間正常飼養(yǎng)，保持飼養(yǎng)間溫度22±2℃

2、，濕度50±5％及12h 光照周期，并密切跟蹤觀察雌性大鼠的體重及體型。于雌性大鼠產(chǎn)前3天將其提出分籠，單獨(dú)飼養(yǎng)。雄性乳鼠出生后48±2h 內(nèi)腹腔注射STZ（90 mg/kg）。待乳鼠28日齡時(shí)斷乳分籠，正常飼養(yǎng)，于其6﹑8﹑10﹑12﹑14 及16周齡時(shí)檢測(cè)其空腹及餐后血糖、甘油三酯、膽固醇、胰島素及體重水平，以掌握該模型的基本特征。
　　 結(jié)果：按此方法造模，模型鼠成年后狀態(tài)較好，但體重顯著性降低，空腹血糖水平進(jìn)行性升高，餐

3、后血糖及餐后甘油三酯水平顯著高于正常大鼠，空腹甘油三酯水平、空腹和餐后膽固醇水平升高不明顯，空腹胰島素水平顯著性降低。
　　 結(jié)論：乳鼠腹腔注射STZ 誘導(dǎo)T2DM 大鼠模型較好的模擬了人類(lèi)T2DM的病理生理特征及其典型病程，即疾病早期主要表現(xiàn)為顯著升高的餐后血糖水平及糖耐量受損，后期空腹血糖水平升高且伴有明顯的脂代謝紊亂。該模型的成模率為100％，是一種較理想的T2DM動(dòng)物模型，可為抗糖尿病新藥的初期篩選提供理想平臺(tái)。

4、　　 第二部分、PMQ 對(duì)乳鼠腹腔注射STZ 誘導(dǎo)2 型糖尿病大鼠模型的藥效學(xué)研究
　　 目的：于乳鼠腹腔注射STZ 誘導(dǎo)2 型糖尿病大鼠模型中篩選PMQ是否具有改善糖脂代謝紊亂的作用。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)分為六組（n=9-12）：正常對(duì)照組；糖尿病組（模型對(duì)照組）；PMQ 各劑量組（模型鼠分別灌胃給予PMQ 2.5，5，10，20mg/kg）。各組大鼠自6周齡開(kāi)始給藥，給藥時(shí)間定為每日8：30 a.m.，持續(xù)10周。正

5、常對(duì)照組和糖尿病組大鼠給予藥物溶劑灌胃給藥。本研究中所選PMQ 劑量是基于本實(shí)驗(yàn)室前期PMQ 于大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)特征的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。給藥期間每日稱(chēng)取大鼠體重，并跟蹤記錄其飲水和進(jìn)食量。分別在大鼠12和16周齡（給藥后6和10周）時(shí)檢測(cè)各組大鼠空腹及餐后血糖、甘油三酯和胰島素水平。給藥結(jié)束后進(jìn)行OGTT 實(shí)驗(yàn)，宰殺大鼠取肝、胰腺、腎臟等器官，計(jì)算器官指數(shù)，并做胰腺組織切片行HE 染色。
　　 結(jié)果：PMQ 給藥可劑量依賴(lài)性地降低模型

6、大鼠顯著升高的餐后血糖和甘油三酯水平，延緩其空腹血糖水平的升高，改善糖尿病大鼠的多飲多食癥狀及其糖耐量受損程度，顯著上調(diào)外周組織的胰島素敏感性，降低糖尿病大鼠異常升高的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平。
　　 結(jié)論：PMQ在乳鼠腹腔注射STZ 誘導(dǎo)T2DM 大鼠模型中表現(xiàn)出顯著的改善糖脂代謝紊亂的作用。
　　 第三部分、胃袖狀切除術(shù)對(duì)乳鼠腹腔注射STZ 誘導(dǎo)2 型糖尿病大鼠模型的效應(yīng)研究
　　 目的：研究胃袖狀切除術(shù)于乳鼠腹腔

7、注射STZ 誘導(dǎo)T2DM 大鼠模型中對(duì)模型大鼠體重及其糖代謝的影響。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)分為手術(shù)組（n=6）和假手術(shù)組（n=6）。模型大鼠術(shù)前禁食12h,可自由攝水。大鼠腹腔注射苯巴比妥鈉（40 mg/kg），待動(dòng)物麻醉好后將其仰面固定于動(dòng)物手術(shù)臺(tái)上，術(shù)前30min 預(yù)防性肌注青霉素G（50 mg/kg）以防止術(shù)后感染。備皮，沿腹中線(xiàn)做一長(zhǎng)約3-4 厘米的切口，分離皮膚及肌肉層，小心將胃游離出來(lái)，用無(wú)創(chuàng)性止血鉗沿胃大彎將胃固定，用

8、無(wú)菌外科手術(shù)刀片沿著胃大彎切除約70％-80％體積的胃組織，殘胃用碘伏擦拭消毒后用5-0 規(guī)格手術(shù)線(xiàn)縫合，縫合結(jié)束后松開(kāi)無(wú)創(chuàng)止血鉗，檢查縫合效果，如有出血點(diǎn)適當(dāng)補(bǔ)針。手術(shù)完畢后用無(wú)菌生理鹽水沖洗腹腔，最后用3-0 規(guī)格手術(shù)線(xiàn)縫合腹腔。假手術(shù)組與手術(shù)組步驟基本相同，但并不切除胃組織。各組大鼠術(shù)后恢復(fù)一周，至第2周開(kāi)始每周記錄其體重、進(jìn)食和飲水量，術(shù)后第4周和第8周兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別檢測(cè)大鼠空腹和餐后血糖水平，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)檢測(cè)各組大鼠空腹胰島素、

9、GIP、活性GLP-1 及ghrelin 水平。
　　 結(jié)果：與假手術(shù)組相比，胃袖狀切除術(shù)可顯著控制模型大鼠術(shù)后的體重增長(zhǎng)，減少其飲水和進(jìn)食量，但胃袖狀切除術(shù)在乳鼠腹腔注射STZ 誘導(dǎo)T2DM 大鼠模型中沒(méi)有明顯的改善糖代謝紊亂的作用，相應(yīng)的，兩組大鼠糖代謝相關(guān)激素如GLP-1、GIP和胰島素水平?jīng)]有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。與假手術(shù)組大鼠相比，SG 術(shù)后手術(shù)組大鼠的ghrelin 水平顯著降低。
　　 結(jié)論：胃袖狀切除術(shù)可顯著控制大