2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、張仲景《金匱要略》記載,“血不利則為水,血水本同源”,提示“血與水”生理上相互化生且功用相近,病理上“瘀水關(guān)聯(lián)”?!堆C論》提出“凡調(diào)血,必先治水,治水即以治血,治血即以治水”的中醫(yī)血證治療思想,基于此創(chuàng)立“活血利水”法。“活血利水”法是臨床治療瘀血及水腫病的理論依據(jù)。其本質(zhì)主要體現(xiàn)“活血促進(jìn)利水與利水益于活血”兩個(gè)方面,即“活血消腫”與“活血利尿”兩種亞法。因此,從臨床實(shí)踐與藥理研究探索“活血利水”法本質(zhì),應(yīng)以“消腫與利尿”為切入點(diǎn)。

2、
  水通道蛋白(Aquaporin,AQPs)是一種細(xì)胞膜糖蛋白,與水通透性(吸收、分泌、轉(zhuǎn)運(yùn))有關(guān)、維持細(xì)胞內(nèi)外水平衡。AQPl廣泛分布于與水分泌和吸收有關(guān)的上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。AQP1是紅細(xì)胞(RedBloodCell,RBC)膜的主要水通道蛋白,調(diào)節(jié)血液與紅細(xì)胞內(nèi)水液轉(zhuǎn)運(yùn)。AQP1在腎臟主要集中于近曲小管(ProximalTubule,PT)上皮細(xì)胞和髓袢的細(xì)段,參與水的重吸收和尿濃縮。RBC變形能力與“血瘀證”發(fā)生密切相

3、關(guān),而腎組織水腫與AQP1蛋白表達(dá)降低有關(guān)。可見AQP1的表達(dá)變化與組織血瘀、水腫關(guān)系緊密,與中醫(yī)“消腫”作用相關(guān)。AQP2在腎臟主要表達(dá)于遠(yuǎn)端小管和集合管(collectingduct,CD)主細(xì)胞頂膜,參與尿濃縮和稀釋。因此腎臟AQP1和AQP2功能與“利尿”作用相關(guān)。我們認(rèn)為AQP1和AQP2是揭示“活血消腫”和“活血利尿”本質(zhì)的關(guān)鍵分子。
  血管內(nèi)皮細(xì)胞(Vascularendothelialcell,VEC)是襯覆于血

4、管內(nèi)壁的一層扁平細(xì)胞,不僅是構(gòu)成血管通透性的主要屏障,并且可以合成及分泌多種物質(zhì),直接參與體內(nèi)的病理生理過程。VEC損傷后既能導(dǎo)致血管擴(kuò)張、血小板黏附和聚集降低,血液黏度下降;又能導(dǎo)致血管收縮、微循環(huán)血流減少,血液淤積;這兩者均伴隨水腫的形成。VEC和RBC與微循環(huán)障礙關(guān)系最為密切。RBC變形能力調(diào)節(jié)血液黏度和微循環(huán)有效灌注,與《素問·調(diào)經(jīng)論篇》所載“病在脈、調(diào)之血,病在血、調(diào)之絡(luò)”的理論不謀而合。而且AQP1在VEC有表達(dá),是調(diào)節(jié)水液

5、轉(zhuǎn)運(yùn)的重要水通道蛋白,AQP1表達(dá)變化必然會(huì)導(dǎo)致組織間水液變化。因此VEC是揭示“活血利水”之亞法本質(zhì)的重要效應(yīng)位點(diǎn)。
  丹參(SalviaMiltiorrhizaBunge,Salvia)又名赤參,是雙子葉植物唇形科植物干燥根及根莖。具有“活血調(diào)經(jīng),祛瘀止痛,涼血消癰,清心除煩,養(yǎng)血安神”功效。丹參可以降低血液粘度、抑制血小板聚集、抗血栓形成、改善微循環(huán)又能減輕VEC損傷、降低血管通透性,減輕血管源性水腫[3]。同時(shí)丹參還可以

6、調(diào)節(jié)AQPs表達(dá)。
  我們前期研究認(rèn)為,“活血法”與AQP1及AQP2表達(dá)變化有關(guān),而AQP1和AQP2是機(jī)體內(nèi)部調(diào)節(jié)水液平衡的主要水通道蛋白,因此推測“活血利水”法可能與AQP1和AQP2的表達(dá)變化關(guān)系緊密?!盎钛狈ǚ譃椤盎钛[”和“活血利尿”兩個(gè)亞法,我們推測“活血消腫”作用可能與表達(dá)于VEC及近端小管上皮細(xì)胞的AQP1變化有關(guān),“活血利尿”作用可能與表達(dá)于遠(yuǎn)端小管和集合管主細(xì)胞的AQP2有關(guān)。
  實(shí)驗(yàn)一:丹

7、參調(diào)節(jié)損傷局部肌肉及腎組織AQP1表達(dá)變化
  目的:探討丹參對(duì)損傷局部、腎組織AQP1表達(dá)的變化,揭示“活血消腫”作用的內(nèi)涵。方法:SPF級(jí)雄性SD大鼠50只,隨機(jī)分為正常組、模型組,分別為10只、40只。模型組再分為空白組、丹參組、干預(yù)組、抑制組,每組10只。采用“定量打擊”法制備模型。運(yùn)用血液流變學(xué)檢測全血黏度及紅細(xì)胞變形能力;應(yīng)用HE染色觀察大鼠損傷局部肌肉與腎組織病理變化;電鏡觀察局部肌肉與腎組織微觀結(jié)構(gòu)改變;觀察大鼠局

8、部肌肉與腎組織濕/干質(zhì)量比值變化;運(yùn)用免疫組織化學(xué)(ICC)檢測方法和Westernblot檢測方法分析大鼠局部肌肉和與腎組織AQP1表達(dá)變化。揭示了血瘀證模型局部肌肉及腎組織的瘀血與水腫跟AQP1表達(dá)變化有關(guān),通過丹參對(duì)AQP1表達(dá)的調(diào)節(jié)詮釋“活血消腫”作用的內(nèi)涵。結(jié)果:1.與正常組比較,空白組大鼠精神萎靡不振,損傷后肢皮膚出現(xiàn)紫紅腫脹,跛行。飲食量明顯減少,飲水量增多,尿量增多。丹參組大鼠較空白組后肢腫脹程度明顯減輕,抑制組無明顯緩

9、解。2.局部肌肉與腎組織濕/干質(zhì)量比值示:與正常組比較,空白組濕/干質(zhì)量比值明顯升高(P<0.05);與空白組比較,丹參組比值降低(P<0.05)。3.病理結(jié)果:空白組大鼠損傷肌纖維索周圍見大量增生毛細(xì)血管,大量淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞等單核細(xì)胞為主的炎癥細(xì)胞。腎組織出現(xiàn)腎小球囊腔有不同程度的擴(kuò)張,并有瘀血,上皮細(xì)胞增生。VEC管腔狹窄、RBC聚集。腎小管擴(kuò)張,上皮細(xì)胞腫脹變性。丹參組肌肉皮下瘀血情況好轉(zhuǎn),損傷肌纖維索周圍增生的毛細(xì)血管減少,炎

10、癥細(xì)胞消失,接近正常組肌纖維結(jié)構(gòu)。腎組織示腎小管-間質(zhì)病變有改善,少數(shù)間質(zhì)毛細(xì)血管輕度充血。抑制組可見少量炎癥細(xì)胞浸潤。4.電鏡結(jié)果:空白組大鼠肌纖維細(xì)胞核內(nèi)移,線粒體腫脹、空泡變性。間質(zhì)毛細(xì)血管充血。腎小球毛細(xì)血管充血,上皮細(xì)胞有空泡,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,線粒體空泡變性。近端小管上皮細(xì)胞線粒體腫脹。腎間質(zhì)血管充血。丹參組肌纖維線粒體增生、部分腫脹,腎小球上皮細(xì)胞輕度腫脹、線粒體輕度腫脹、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕度擴(kuò)張。近端小管上皮細(xì)胞線粒體腫脹減輕。抑制組與

11、空白組接近。腎小管上皮細(xì)胞輕中度腫脹,間質(zhì)毛細(xì)血管充血。5.AQP1的表達(dá)顯示:AQP1表達(dá)于腎臟近曲小管上皮細(xì)胞,一直延續(xù)至髓袢降支細(xì)段。在毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞也有表達(dá),同時(shí)AQP1是紅細(xì)胞的主要水通道白。與正常組比較,空白組大鼠局部肌肉AQP1表達(dá)明顯升高(P<0.05),腎組織AQP1表達(dá)明顯降低(P<0.05)。丹參組較空白組AQP1表達(dá)明顯升高(P<0.05)。
  結(jié)論:1.丹參可明顯改善血瘀證模型損傷局部肌肉及腎組織瘀血

12、、腫脹等癥狀,同時(shí)可以升高AQP1的表達(dá)。提示丹參“活血消腫”的功效可能通過升高AQP1表達(dá)而發(fā)揮作用。
  2.VEC損傷與血瘀證的發(fā)生關(guān)系緊密
  3.RBC變形能力減低可能與血瘀證的發(fā)生有關(guān),AQP1是RBC主要的水通道蛋白,我們推測“活血消腫”法可能與RBC上的AQP1也有關(guān)系,但是具體的調(diào)節(jié)機(jī)制還有待研究。
  實(shí)驗(yàn)二:丹參調(diào)節(jié)腎組織AQP2表達(dá)變化
  目的:通過丹參對(duì)腎組織AQP2表達(dá)的調(diào)節(jié),探討“

13、活血利尿”作用本質(zhì)。方法:代謝籠收集大鼠尿液,測量24h尿量;運(yùn)ELASA法測定大鼠尿液AQP2含量變化;運(yùn)用免疫組織化學(xué)檢測方法和Westernblot檢測方法分析各組大鼠腎組織AQP1、AQP2表達(dá)變化。結(jié)果:1.24h尿液AQP2含量檢測示空白組較正常組濃度值升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),丹參組大鼠比空白組濃度值降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.AQP2表達(dá):與空白組比較,丹參組大鼠腎組織AQP2表達(dá)明顯降低(P<0.0

14、5)。
  結(jié)論:1.丹參可明顯改善血瘀證模型腎組織水腫,增加尿量
  2.丹參可以降低AQP2的表達(dá)。揭示“活血利尿”作用可能與AQP2表達(dá)降低有關(guān)。
  小結(jié):
  1.“活血利水”法可以分為“活血消腫”和“活血利尿”兩個(gè)亞法。
  2.丹參可以升高VEC及腎臟近端小管上皮細(xì)胞上的AQP1表達(dá),從而減輕局部肌肉與腎組織間的水腫,說明“活血消腫”作用與AQP1表達(dá)有關(guān)。還能降低腎臟遠(yuǎn)端小管和集合管主細(xì)胞A

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