擴(kuò)張型心肌病患者外周血中CD4+CD25highCD127low--調(diào)節(jié)性T細(xì)胞抑制功能的檢測及臨床意義.pdf

1、目的：擴(kuò)張型心肌病的發(fā)病機(jī)制與自身免疫系統(tǒng)功能紊亂密切相關(guān)，并且CD4+調(diào)節(jié)性T（Treg）細(xì)胞在維持自身免疫耐受方面起著重要作用。因此，在本研究中，我們通過比較擴(kuò)張型心肌?。―CM）患者和正常對(duì)照者外周血中Treg 細(xì)胞的水平及免疫調(diào)節(jié)功能，以探討Treg 細(xì)胞在擴(kuò)張型心肌病發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮的作用。方法：分別入選25例擴(kuò)張型心肌病患者和25例正常對(duì)照者，通過流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血中CD4+CD25+T細(xì)胞水平，應(yīng)用熒光實(shí)時(shí)定量RT-PCR

2、和Western Blot 技術(shù)評(píng)價(jià)外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）FOXP3 mRNA和蛋白表達(dá)水平。在檢測CD4+CD25highCD127low/? T 細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能實(shí)驗(yàn)中，入選8例擴(kuò)張型心肌病患者和8例正常對(duì)照者，用人的CD4+CD25+CD127dim/-Regulatory T 細(xì)胞分選試劑盒從PBMCs中分選出CD4+CD25highCD127low/-Treg 細(xì)胞與CD4+CD25－效應(yīng)性T（Tresp）細(xì)胞進(jìn)行共同

3、培養(yǎng)和交叉培養(yǎng)，然后用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)滲入法測量細(xì)胞增殖。結(jié)果：與正常對(duì)照者相比，擴(kuò)張型心肌病患者外周血中CD4+CD25+T細(xì)胞水平顯著減少（P＜0.05），同時(shí)PBMCs表達(dá)FOXP3 mRNA和蛋白水平均明顯降低（P 均＜0.05）。CD4+CD25highCD127low/-Treg 細(xì)胞的免疫抑制功能研究顯示與正常對(duì)照組相比，擴(kuò)張型心肌病患者的Treg 細(xì)胞抑制同源CD4+CD25－T 細(xì)胞增殖的免疫抑制功能

4、部分受損（43.83±3.19％ VS 63.17±3.66％，P=0.01），但是DCM 患者外周血中的Treg細(xì)胞能有效地抑制正常對(duì)照者體內(nèi)的Tresp 細(xì)胞的增殖，其抑制率與正常對(duì)照組外周血中的Treg 細(xì)胞抑制同源Tresp 細(xì)胞的增殖的抑制率處于相似水平，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.286）；然而正常對(duì)照組外周血中Treg 細(xì)胞不能有效地抑制擴(kuò)張型心肌病患者外周血中Tresp 細(xì)胞的增殖。結(jié)論：擴(kuò)張型心肌患者體內(nèi)CD4+CD25