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1、目的:探討擴(kuò)張型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)患者循環(huán)中CD4+LAP+(latency-associated peptide)Tregs(調(diào)節(jié)性T細(xì)胞)的數(shù)量和功能是否受損。
方法和結(jié)果:47例擴(kuò)張型心肌病的患者(包括男性30名,女性17名,52±14歲)和57例正常對(duì)照者(包括男性30名,女性27名,47±10歲),獲取其外周血樣本,通過密度梯度離心法分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripher
2、al blood mononuclear cell,PBMC)用于流式細(xì)胞術(shù)分析、FACS(Fluorescence Activated Cell Sorter)分選、實(shí)時(shí)PCR和細(xì)胞培養(yǎng)。同時(shí)用電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清NT-proBNP(N-terminal pro-Brain Natriuretic Peptide)水平。通過流式細(xì)胞術(shù)從PBMC中分選出CD4+LAP+Tregs細(xì)胞、Tresps(CD4+LAP-CD25int/low
3、 T細(xì)胞)和CD4+LAP-CD25highTregs細(xì)胞。與正常對(duì)照組(2.31±0.25,P<0.01)相比,擴(kuò)心病患者(1.37±0.16%)循環(huán)中CD4+LAP+Tregs在CD4+T細(xì)胞群體中所占的比例大大降低,且CD4+LAP+Tregs數(shù)量與左室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction,LVEF)成正相關(guān),與左室舒張末期內(nèi)徑(leftventricularend diastolic d
4、iameter,LVEDD)和血清NT-proBNP成負(fù)相關(guān)。T細(xì)胞增殖和抑制實(shí)驗(yàn)分為3個(gè)實(shí)驗(yàn)組:1)5×104 Tresps單獨(dú)培養(yǎng);2)5×104 CD4+LAP+Tregs和5×104 Tresps以不同比例共同培養(yǎng)(Treg:Tresp比例為1:1,1:2和1:4);3)交叉實(shí)驗(yàn),來自擴(kuò)心病患者的5×104 CD4+LAP+Tregs與對(duì)照組的5×104 Tresps共培養(yǎng),來自對(duì)照組的5×104 CD4+LAP+Tregs與擴(kuò)
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