澤瀉湯對(duì)高脂血癥大鼠肝組織PPARαRNA、ACOmRNA基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立高脂血癥大鼠模型，觀察澤瀉湯對(duì)高脂血癥大鼠脂代謝、氧化損傷、肝組織形態(tài)學(xué)及PPARαmRNA、ACOmRNA基因表達(dá)的影響，以期深入探究澤瀉湯防治高脂血癥可能的作用機(jī)制，為其治療高脂血癥提供理論依據(jù)。
　　 方法:從河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心購(gòu)買SD大鼠50只，體重160～180g，雄性。大鼠自由飲水進(jìn)食，飼養(yǎng)于18℃～22℃明暗各12小時(shí)的清潔級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。正常喂養(yǎng)1周后，按體重隨機(jī)分為5組，每組10只，分

2、別為:正常對(duì)照組（簡(jiǎn)稱正常組）、模型對(duì)照組（簡(jiǎn)稱模型組）、澤瀉湯高劑量組（簡(jiǎn)稱高劑量組）、澤瀉湯低劑量組（簡(jiǎn)稱低劑量組）、陽(yáng)性藥（血脂康膠囊）對(duì)照組（簡(jiǎn)稱對(duì)照組）。正常組喂飼普通飼料，其余各組均喂飼高脂飼料復(fù)制高脂血癥模型，高脂飼料組成:膽鹽0.5％+膽固醇1.5％+豬油10％+普通飼料88％。造模時(shí)間共計(jì)4周。同時(shí)，各治療組灌服治療藥或?qū)φ账帲＝M與模型組灌服等量生理鹽水，每天上午灌胃1次，每次用藥體積均按1ml/100g計(jì)算。于最

3、后一次給藥后禁食12h麻醉狀態(tài)下股動(dòng)脈取血，將血樣離心，分離血清，然后于-20℃貯存，檢測(cè)血清中TG、TC、HDL-C、LDL-C、SOD和MDA含量或活性變化。同時(shí)迅速剖取肝臟，取肝右葉部分肝組織，于-70℃冰箱貯存，用于PPARαmRNA、ACOmRNA基因表達(dá)變化的檢測(cè)。然后取相同部位部分適宜大小肝組織置于4％多聚甲醛液中固定，石蠟包埋，切片，HE染色，以備光鏡觀察。
　　 結(jié)果:
　　 1、澤瀉湯對(duì)各組大鼠血清T

4、G、TC、HDL-C、LDL-C含量的影響
　　 與正常組比較，模型組大鼠血清TG、TC、LDL-C含量(2.58±0.29，4.55±0.42，2.93±0.31)明顯升高(0.79±0.08，1.78±0.21，0.67±0.09)(P＜0.01)，HDL-C含量(0.42±0.05)明顯降低(0.84±0.08)（P＜0.01），提示模型組大鼠存在顯著的血脂代謝紊亂，造模成功。用藥物進(jìn)行干預(yù)后，各用藥組均能顯著降低模型大鼠

5、血清TG、TC、LDL-C的含量(P＜0.01)，升高HDL-C的含量(P＜0.01)。其中，高劑量組和對(duì)照組的TG、TC和LDL-C含量(1.24±0.11，2.23±0.30，1.13±0.19，1.17±0.12，2.32±0.39，1.11±0.17)均低于低劑量組（1.70±0.20，3.35±0.26，1.82±0.21）(P＜0.01)，對(duì)照組和高劑量組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05）。高、低劑量組和對(duì)照組均能顯著升高HD

6、L-C含量(0.71±0.08，0.69±0.07，0.75±0.10)（P＜0.01），高、低劑量組和對(duì)照組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　 2、澤瀉湯對(duì)各組大鼠血清SOD活性和MDA含量的影響
　　 與正常組相比較，模型組大鼠血清SOD活性(52.71±8.41)顯著降低(99.39±9.47)(P＜0.01)，MDA的含量(23.14±2.55)顯著升高(8.19±0.78)(P＜0.01)。用藥物進(jìn)行干預(yù)

7、后，各用藥組均能顯著增強(qiáng)模型大鼠血清SOD活性(P＜0.01)，顯著降低MDA含量(P＜0.01)。澤瀉湯高劑量組SOD活性(90.04±3.48)顯著高于對(duì)照組(77.00±9.33)和低劑量組(81.18±8.63)(P＜0.01或P＜0.05)，低劑量組和對(duì)照組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。高、低劑量組MDA含量(10.65±1.33，11.12±1.06)低于對(duì)照組(14.50±1.79)(P＜0.01)，高、低劑量組之間無(wú)

8、顯著差異（P＞0.05）。
　　 3、澤瀉湯對(duì)各組大鼠肝組織形態(tài)學(xué)的影響
　　 正常組大鼠肝小葉和肝血竇結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞排列整齊，圍繞中央靜脈呈放射狀，細(xì)胞核形態(tài)正常，胞漿均勻。模型組大鼠肝細(xì)胞排列紊亂，脂肪變性明顯，細(xì)胞形狀不規(guī)則，大小不一致，多數(shù)胞漿中可見(jiàn)大小不等、數(shù)目眾多的脂肪滴，細(xì)胞核偏離正常位置。與模型組比較，各治療組大鼠肝細(xì)胞脂肪空泡和脂滴數(shù)量顯著減少，肝小葉和肝血竇結(jié)構(gòu)比較清晰，脂肪變性程度均有明顯改善。<

9、br>　　 4、澤瀉湯對(duì)各組大鼠肝組織PPARαmRNA、ACOmRNA基因表達(dá)的影響
　　 與正常組相比較，模型組大鼠PPARαmRNA、ACOmRNA的表達(dá)(0.313±0.036，0.285±0.030)明顯降低(0.667±0.027，0.880±0.028)(P＜0.01)。用藥后，各用藥組均能顯著增強(qiáng)PPARαmRNA、ACOmRNA的表達(dá)(P＜0.01)。澤瀉湯高劑量組和低劑量組PPARαmRNA的表達(dá)(0.62

10、5±0.014，0.590±0.029)均高于對(duì)照組(0.412±0.032)(P＜0.01)，并且高劑量組表達(dá)略高于低劑量組(P＜0.05）。高劑量組和低劑量組ACOmRNA的表達(dá)(0.745±0.034，0.732±0.028)之間無(wú)差異(P＞0.05)，且均高于對(duì)照組(0.353±0.044)(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1、澤瀉湯能夠明顯降低高脂血癥大鼠血清TG、TC、LDL-C的含量，升高HDL-C含

11、量，具有良好的調(diào)節(jié)血脂的作用。
　　 2、澤瀉湯能增強(qiáng)高脂血癥大鼠血清SOD的活性，降低MDA的含量，有較好的清除自由基、增強(qiáng)抗氧化的作用，可調(diào)節(jié)和改善自由基代謝
　　 3、澤瀉湯可明顯改善高脂血癥大鼠肝組織的病變程度，表現(xiàn)為用藥后肝細(xì)胞內(nèi)脂肪空泡和脂滴數(shù)量明顯減少，大鼠肝小葉和肝血竇結(jié)構(gòu)清晰，脂肪變性程度有明顯改善。
　　 4、澤瀉湯能增強(qiáng)高脂血癥大鼠肝組織PPARαmRNA及其下游基因ACOmRNA的表達(dá)，促