MCM2和Ki-67在白血病細(xì)胞中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：探討微小染色體維持蛋白MCM2和核增殖抗原Ki-67在白血病細(xì)胞中的表達(dá)以及二者評(píng)價(jià)細(xì)胞增殖的關(guān)系，為白血病的發(fā)病機(jī)制、診斷治療和預(yù)后判斷提供依據(jù)。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)部分：
　　 (1)培養(yǎng)白血病細(xì)胞系HL-60和K562，并以阿糖胞苷(Ara-C)進(jìn)行藥物干預(yù)，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，通過(guò)MTT比色法檢測(cè)藥物干預(yù)的細(xì)胞抑制率。實(shí)驗(yàn)分組：處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的白血病細(xì)胞（A組）；處于饑餓狀態(tài)的非對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的白血病細(xì)胞（

2、B組）；Ara-C藥物干預(yù)的白血病細(xì)胞（C組）；正常人外周血粒細(xì)胞（D組）和淋巴細(xì)胞（E組）。收集各組細(xì)胞，利用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)細(xì)胞中MCM2和Ki-67蛋白的表達(dá)，對(duì)細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)率進(jìn)行半定量分析。
　　 (2)搜集我院兒科2009年5月至2009年12月初發(fā)急性白血病患兒12例為實(shí)驗(yàn)組，非惡性血液系統(tǒng)疾病患兒10例為對(duì)照組。在無(wú)菌條件下按常規(guī)操作穿刺，取髂后上棘骨髓1ml，肝素鈉抗凝，按常規(guī)方法分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞，細(xì)胞涂片

3、后利用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)單個(gè)核細(xì)胞中的MCM2和Ki-67蛋白的表達(dá)，對(duì)細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)率進(jìn)行半定量分析。
　　 結(jié)果：(1)處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的K562細(xì)胞和HL-60細(xì)胞MCM2蛋白的表達(dá)、Ki-67蛋白的表達(dá)均顯著高于對(duì)照組細(xì)胞(P＜0.05)。處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的K562細(xì)胞株的MCM2與Ki-67蛋白表達(dá)存在正相關(guān)(r＝0.58，P＜0.05)，處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HL-60細(xì)胞株MCM2與Ki-67蛋白表達(dá)亦存在直線正相關(guān)(r＝0

4、.44，P＜0.05)。(2)處于饑餓狀態(tài)的K562細(xì)胞和HL-60細(xì)胞MCM2蛋白的表達(dá)、Ki-67蛋白的表達(dá)顯著高于對(duì)照組細(xì)胞(P＜0.05)及Ara-c藥物干預(yù)組(P＜0.05)，但較對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞顯著降低(P＜0.05)。(3)Ara-C藥物干預(yù)的K562細(xì)胞和HL-60細(xì)胞MCM2蛋白、Ki-67蛋白表達(dá)較對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞顯著降低(P＜0.05)。(4)急性白血病患兒的骨髓單個(gè)核細(xì)胞的MCM2，Ki-67蛋白表達(dá)均高于對(duì)照組患兒