HER2與HER4在人肺腺癌A549細胞培美曲塞繼發(fā)性耐藥中的作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、[目的]通過體外誘導耐藥建立人肺腺癌A549細胞系的培美曲塞耐藥細胞株，檢測其在生物學特性方面與親本株的差異，并進一步研究其耐藥性發(fā)生與HER2/neu和HER4基因mRNA表達之間的關系。
　　 [方法]通過高濃度反復間歇誘導法建立A549的培美曲塞耐藥細胞系。CCK8法檢測細胞增殖，測定細胞耐藥性，繪制生長曲線，計算倍增時間;流式細胞術法檢測細胞周期分布及細胞凋亡水平;實時熒光定量PCR法檢測耐藥株及親本株HER2/neu和

2、HER4的mRNA表達。
　　 [結(jié)果]歷經(jīng)6個月建立了耐藥指數(shù)為6.7倍的培美曲塞耐藥的A549/PEM細胞系，其較親本株的倍增時間延長(33.5±1.71h vs27.1±1.15h);流式細胞術檢測結(jié)果示:與親本株比較，A549/PEM處于G1期的細胞比例增加(66.03±1.61％ vs57.92±1.73％)，S期細胞比例降低(30.05±1.25％ vs37.51±1.31％)，差別均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);在

3、高濃度的PEM作用24h后，檢測A549與A549/PEM細胞凋亡率分別為23.52％和10.99％，差別有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。RT-PCR檢測結(jié)果示:A549/PEM較親本株HER2/neu與HER4基因的mRNA表達水平分別增高100.3％和91.8％，差別均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 [結(jié)論]培美曲塞耐藥的肺腺癌A549/PEM細胞與親本株的生物學特性有差別;肺腺癌培美曲塞繼發(fā)性耐藥的產(chǎn)生可能與HER2/

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