黃綠青霉菌產毒影響因素的實驗觀察.pdf

1、目的： 在實驗室條件下觀察溫度、pH和培養(yǎng)時間對黃綠青霉菌(PCV)產毒的影響，以及溫度、pH對黃綠青霉菌產毒的交互作用。 方法： 用察氏培養(yǎng)基培養(yǎng)黃綠青霉菌。黃綠青霉菌菌株購自中科院微生物研究所。用實驗法觀察單一因素如溫度、pH和培養(yǎng)時間對產毒量的影響，采用析因設計的方法觀察溫度、pH 對產毒的交互作用。溫度分為低溫(8℃)恒溫、高溫 (30℃) 恒溫以及8～30℃變溫三種情況，變溫培養(yǎng)方法為白天30℃，夜間8

2、℃。pH則是通過添加NaOH 和 HCl 溶液將培養(yǎng)基控制在pH為5.0、7.0和9.0。二氯甲烷提取樣品中的黃綠青霉毒素(CIT)。用高效液相色譜法檢測毒素含量。高效液相色譜柱為SiO<,2> (4.6mm×150mm，5μm)；流動相為乙酸乙酯：正己烷(7∶3，V/V)；流速為1ml/min；檢測波長為383nm；分析時間10min。 結果： 1.單一因素對黃綠青霉菌產毒的影響 (1) 黃綠青霉菌在高溫(30

3、℃)恒溫條件下的產毒量為 231.02±9.33 μg/g 培養(yǎng)基；在低溫(8℃)恒溫條件下的產毒量為222.36±23.66μg/g 培養(yǎng)基；在變溫(8～30℃) 條件下的產毒量為 532.16±14.90μg/g 培養(yǎng)基；在變溫條件下的產毒量明顯高于高溫和低溫條件的產毒量(P<0.05)，高溫(30℃)恒溫條件下產毒量與低溫(8℃)恒溫無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 (2)黃綠青霉菌在中性(pH=7.0)條件下的產毒量為23

4、1.02±9.33μg/g 培養(yǎng)基；在酸性(pH=5.0)條件下的產毒量為161.86±40.89μg/g培養(yǎng)基；在堿性(pH9.0)條件下的產毒量為202.00±50.59μg/g培養(yǎng)基；中性和堿性條件下產毒量無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，且均高于酸性條件下的產毒量(P<0.05)。 (3)黃綠青霉菌培養(yǎng)5d的產毒量為87.06±6.32μg/g培養(yǎng)基；培養(yǎng)10d的產毒量為309.90±42.47μg/g 培養(yǎng)基；培養(yǎng)15d的

5、產毒量為236.38±34.78μg/g培養(yǎng)基；培養(yǎng)20d的產毒量為153.94±38.80μg/g培養(yǎng)基；結果顯示，CIT產量隨培養(yǎng)時間的延長而增加，在培養(yǎng)10d時達到最高(P<0.05)，其后隨時間延長，產毒量反而下降。 2.溫度和pH對黃綠青霉菌產毒的交互作用 黃綠青霉菌在高溫、酸性條件下的產毒量為92.14±16.00μg/g培養(yǎng)基；在高溫、堿性條件下的產毒量為 234.76±70.79μg/g培養(yǎng)基；在低溫、

6、酸性條件下的產毒量為 101.70±5.57μg/g培養(yǎng)基；在低溫、堿性條件下的產毒量為91.02±26.70μg/g培養(yǎng)基；經分析，溫度和pH對黃綠青霉菌產毒的影響存在交互作用(P<0.05)。 結論： 1.溫度、pH和生長時間對黃綠青霉菌產毒有較大影響，尤其在變溫條件下、中性的環(huán)境中產毒量較高，培養(yǎng) 10d是黃綠青霉菌產毒量達到峰值。 2.溫度和pH對黃綠青霉菌的產毒有交互作用，在變溫、偏堿性的條件下，可促進