大鼠自體胸腺腎模型的建立和功能評估.pdf

1、胸腺是中樞性免疫器官，發(fā)揮對T淋巴細胞的選擇發(fā)育功能。自從發(fā)現(xiàn)胎豬胸腺可以選擇發(fā)育人造血干細胞，人們設(shè)想通過胸腺移植，使供體的胸腺在受體體內(nèi)選擇發(fā)育受體T淋巴細胞來誘導受體對供體特異性免疫耐受。已有的研究表明小型豬有功能胸腺的存在對誘導免疫耐受的形成是至關(guān)重要的，至少在免疫耐受的形成階段是不可缺少的。在應用異體胸腺組織移植來誘導免疫耐受時，由于胸腺極富含供體組織抗原，導致移植的胸腺受到強烈排斥而引起免疫耐受誘導失敗，因此受體胸腺的提前切

2、除是必要的。即便如此，胸腺組織移植仍不能誘導小型豬特異性免疫耐受的穩(wěn)定形成，但研究顯示如果把胸腺作為一個帶血管的器官來移植，在一定程度上可以彌補胸腺組織移植的缺陷，而且能更好地誘導特異性免疫耐受的形成。為了達到這一目的，已有的研究嘗試了兩種非常有創(chuàng)意的途徑，一是“胸腺腎”移植，二是帶血管的“胸腺小葉”移植，均取得了良好的效果。前者是把小型豬胸腺行自體腎包膜下移植，構(gòu)建胸腺腎，以使胸腺組織在移植前血管化，研究顯示術(shù)后60天移植在小型豬腎包

3、膜下的胸腺組織恢復正常的宏觀和微觀結(jié)構(gòu)，并支持胸腺細胞的成熟發(fā)育。我們嘗試用大鼠建立了自體胸腺腎模型，以求在行大鼠腎移植的同時能同步將供體血管化的胸腺移植給受體，并對移植胸腺的存活及功能的恢復做了初步的觀察評估，觀察去胸腺成年大鼠自體胸腺在自體腎包膜下血管重建，功能恢復的時間和大鼠外周血T細胞池重建恢復的時間。 方法： 1．SD大鼠分成4組，Ⅰ：去胸腺組(n=12，150～250g)，Ⅱ：自體胸腺腎模型組(n=15，15

4、0～250g)，Ⅲ：假手術(shù)組(n=5，50～100g)，Ⅳ：從Ⅰ組中抽取5只在第8周時加去脾臟。 2．通過流式細胞技術(shù)和組織形態(tài)學來評價胸腺。腎模型中胸腺的血運重建情況及功能。 結(jié)果： 1．Ⅱ組術(shù)后2W已見到明顯有血管自腎門生長入腎包膜下的胸腺組織中，8W時移植的胸腺組織生長增厚，組織學檢查顯示正常胸腺組織結(jié)構(gòu)。6W后，Ⅰ組CD4-CD8-T淋巴細胞比例仍持續(xù)上升，在Ⅳ組中升高得更明顯，而Ⅱ組6W后開始逐漸下降。Ⅰ組CD

5、4+T和CD8+T淋巴細胞在術(shù)后6W后繼續(xù)下降，而Ⅱ組開始回升。Ⅰ組CD4+CD8+T淋巴細胞在術(shù)后6W后仍有波動，后續(xù)的檢測顯示呈低水平，而Ⅱ組6W后較平穩(wěn)。3～4個月后腎包膜下移植的胸腺組織開始逐漸退化。 2．6W后，Ⅰ組CD4-CD8-T淋巴細胞比例仍持續(xù)上升，在Ⅳ組中升高得更明顯，而Ⅱ組6W后開始逐漸下降。Ⅰ組CD4+T和CD8+T淋巴細胞在術(shù)后6W后繼續(xù)下降，而Ⅱ組開始回升。Ⅰ組CD4+CD8+T淋巴細胞在術(shù)后6W后仍