遺傳性與獲得性壓力反射功能缺陷大鼠反射弧受損部位的研究.pdf

1、目的：本研究采用自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、2腎1夾腎血管型高血壓大鼠(2腎1夾)和自發(fā)性壓力感受性反射功能低下大鼠(SLBS)三種動(dòng)物模型，研究混合型、獲得性和遺傳性動(dòng)脈壓力感受性反射(ABR)功能缺陷的發(fā)生部位，是在感受器還是感受器后反射弧的其他部分，以探索高血壓病ABR損傷的規(guī)律，為改善高血壓病的ABR功能以及高血壓病的治療提供新靶點(diǎn)。 方法： 1．建立動(dòng)物模型。在SD大鼠左腎動(dòng)脈放置內(nèi)徑為0.25mm的銀夾，建立

2、Goldblatt 2腎1夾高血壓大鼠模型；假手術(shù)(sham)組只分離血管，不放銀夾，術(shù)后30天用于實(shí)驗(yàn)。從SD大鼠中篩選出動(dòng)脈壓力感受性反射敏感性(BRS)高和低的動(dòng)物，然后分別近親繁殖，得到兩個(gè)血壓正常但遺傳性ABR功能不同的種系，即自發(fā)性壓力感受性反射功能正常/低下大鼠(SNBS/SLBS)。以下每個(gè)步驟都按模型種類分6組：雄性，22周齡，WKY(Wistar-Kyoto，WKY)/SHR大鼠，sham/2K1C大鼠和SNBS/S

3、LBS大各組6～14只動(dòng)物。 2．動(dòng)物篩選：在安定和氯胺酮腹腔麻醉下行股動(dòng)、靜脈插管術(shù)。術(shù)后48小時(shí)，采用計(jì)算機(jī)化清醒自由活動(dòng)大鼠血壓監(jiān)測系統(tǒng)記錄動(dòng)物血壓，Smyth法測定清醒狀態(tài)BRS，本研究采用刺激(血壓變化)-反應(yīng)(心動(dòng)周期變化)曲線的斜率作為BRS。選出符合下列條件的動(dòng)物進(jìn)行電生理實(shí)驗(yàn)：WKY(收縮壓≤140 mmHg，BRS>0.5ms/mmHg)；SHR(收縮壓≥150 mmHg，BRS<0.4 ms/mmHg)。S

4、ham(收縮壓≤140mmHg，BRS>0.5 ms/mmHg)；2K1C(收縮壓≥150 mmHg，BRS<0.4ms/mmHg)。SNBS(收縮壓≤140 mmHg，BRS>0.8 ms/mmHg)；SLBS(收縮壓≤140 mmHg，BRS<0.6 ms/mmHg)。 3．主動(dòng)脈神經(jīng)放電和血壓的記錄：選用符合條件的大鼠，急性手術(shù)并剪斷右側(cè)主動(dòng)脈神經(jīng)后20分鐘，記錄血壓和左側(cè)主動(dòng)脈神經(jīng)放電，作為靜息時(shí)基礎(chǔ)值。股靜脈注射新福林

5、使血壓上升30mmHg，記錄血壓和放電，并計(jì)算變化值百分?jǐn)?shù)(△％)。 4．神經(jīng)電刺激引起的降壓效應(yīng)：選用符合條件的大鼠，分離主動(dòng)脈神經(jīng)并將雙側(cè)神經(jīng)剪斷后，連續(xù)電刺激左側(cè)主動(dòng)脈神經(jīng)中樞端10s，觀察電刺激時(shí)和刺激結(jié)束后血壓及心動(dòng)周期的變化，并計(jì)算變化百分?jǐn)?shù)(△％)。組間比較采用非配對t檢驗(yàn)，前后比較采用配對t檢驗(yàn)。 結(jié)果： 1．WKY/SHR主動(dòng)脈神經(jīng)放電對升壓的反應(yīng)(n=8)：清醒狀態(tài)，SHR的BRS顯著低于WK

6、Y大鼠。麻醉狀態(tài)，SHR收縮壓比WKY高，主動(dòng)脈神經(jīng)基礎(chǔ)放電頻率顯著高于WKY(326±15 vs 250±25 Spikes/s，P＜0.05)。靜脈注射新福林使血壓升高時(shí)，WKY和SHR兩組的放電頻率都顯著加快，SHR頻率加快的程度顯著低于WKY(19.1±4.9％vs52.3±9.1％，P＜0.01)。 2．sham/2腎1夾大鼠主動(dòng)脈神經(jīng)放電對升壓的反應(yīng)：清醒狀態(tài)2腎1夾模型組大鼠血壓顯著高于sham組，BRS顯著低于s

7、ham組，主動(dòng)脈神經(jīng)基礎(chǔ)放電頻率略高于sham組，差異無顯著性。血壓升高時(shí)，放電頻率比靜息時(shí)基礎(chǔ)放電顯著加快。2K1C模型組放電頻率加快的程度低于sham組(37.3±8.2％ vs 61.9±9.0％，P＞0.05)，差異無顯著性。 3．SNBS/SLBS大鼠主動(dòng)脈神經(jīng)放電對升壓的反應(yīng)：SNBS和SLBS大鼠血壓和主動(dòng)脈神經(jīng)基礎(chǔ)放電頻率相同，SLBS大鼠的BRS顯著低下。血壓升高時(shí)放電頻率都顯著加快。SLBS大鼠放電頻率加快的

8、程度低于SNBS大鼠(39.9±9.06％ vs 78.9±12.9％，P＜0.05)。 4．WKY/SHR對電刺激主動(dòng)脈神經(jīng)的反應(yīng)：電刺激左側(cè)主動(dòng)脈神經(jīng)傳入端10s時(shí)，收縮壓(SBP)和舒張壓(DBP)顯著降低，心動(dòng)周期(HP)延長。SHR的收縮壓變化百分?jǐn)?shù)(△％SBP)和舒張壓變化百分?jǐn)?shù)(△％DBP)小于WKY(△％SBP：10.8±1.6 vs15.6±2.0，P＞0.05；△％DBP：13.4±2.3 vs 21±3.8

9、，P＜0.05)。電刺激時(shí)SHR的心動(dòng)周期變化百分?jǐn)?shù)(△％HP)顯著低于WKY(1.2±0.22％ vs 6.68±1.4％，P＜0.01)。 5．sham/2K1C對對電刺激主動(dòng)脈神經(jīng)的反應(yīng)：電刺激時(shí)，2K1C模型組和sham組大鼠血壓都顯著降低，心動(dòng)周期延長。2K1C組△％DBP顯著低于sham組(17.3±2.2vs 26.1±2.1，P<0.05)，△％HP也顯著低于sham組(1.23±0.16 vs8.45±2.3，

10、 P<0.01)。 6．SNBS/SLBS對刺激主動(dòng)脈神經(jīng)的反應(yīng)：電刺激SLBS和SNBS組大鼠左側(cè)主動(dòng)脈神經(jīng)傳入端10s時(shí)，血壓都顯著降低，心動(dòng)周期延長。兩組血壓下降程度接近(△％SBP：18.4±1.9vs 19.5±1.5，P>0.05)；SLBS的△％HP略低于SNBS，(4.28±0.9％vs 5.90±1.1％，P>0.05)差異無顯著性。 7．刺激左側(cè)主動(dòng)脈神經(jīng)結(jié)束后BP和HP的動(dòng)態(tài)變化：SHR和2腎1夾組