中國(guó)人群PBC家系成員的發(fā)病情況及機(jī)制初探.pdf

1、背景：原發(fā)性膽汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)是一種慢性進(jìn)行性自身免疫性疾病,主要發(fā)病于女性,以肝內(nèi)膽管損害和門(mén)脈炎癥為主要特征，逐漸發(fā)生膽汁淤積和肝硬化，最終導(dǎo)致肝衰竭。隨著人們認(rèn)識(shí)水平的提高和抗線粒體抗體(antimitochondrial antibodies,AMA)檢測(cè)技術(shù)的廣泛應(yīng)用，越來(lái)越多的PBC被確診。90％到95％的PBC病人在出現(xiàn)臨床癥狀之前可檢測(cè)到AMA陽(yáng)性。大部分PBC病人

2、無(wú)癥狀，常常因在常規(guī)肝功能檢測(cè)中突然發(fā)現(xiàn)結(jié)果異常而被確診。部分PBC病人在醫(yī)院檢測(cè)時(shí)已經(jīng)發(fā)展到了晚期。目前認(rèn)為及時(shí)使用熊脫氧膽酸能阻止疾病的進(jìn)一步發(fā)展，提高肝移植后生存率。
　　大量的研究發(fā)現(xiàn)PBC具有家族聚集性。據(jù)估計(jì)，1％-7.1％的PBC病人有家族史。PBC常常發(fā)生在有家族史的人群中，尤其是一級(jí)親屬。PBC的研究已經(jīng)進(jìn)行了很多年，但是它的發(fā)生機(jī)制仍不清楚。目前認(rèn)為PBC的發(fā)病機(jī)制是多因素的，主要是基因遺傳易感性與環(huán)境因素相互

3、作用的結(jié)果。PBC在單卵雙胞胎具有非常高的患病一致率，而且PBC的家族聚集性都提示基因因素可能在PBC的發(fā)病中起著非常重要的作用。另外，肝門(mén)CD4+和CD8+T細(xì)胞浸潤(rùn)以及在膽管上皮細(xì)胞上的人類(lèi)白細(xì)胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)Ⅰ和Ⅱ表達(dá)均提示HLA分子在PBC的發(fā)生機(jī)制中起重要的作用。在中國(guó)，研究發(fā)現(xiàn)PBC發(fā)病與DRB1*0701高度相關(guān)，但與DRB1*0801不相關(guān)。與之相反的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)PBC發(fā)病與D

4、RB1*0801高度相關(guān)。目前諸如PBC之類(lèi)的罕見(jiàn)復(fù)雜疾病與HLA遺傳易感性還不很清楚，有關(guān)基因還需要進(jìn)一步的研究。
　　目的：研究原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）家系患者發(fā)病時(shí)的臨床表現(xiàn)、生化指標(biāo)及人類(lèi)白細(xì)胞抗原（HLA）基因分型的特征，分析該疾病的發(fā)病機(jī)制，以提高對(duì)該病的認(rèn)識(shí)。
　　方法：分別用臨床生化分析試劑盒、間接免疫熒光法、免疫印跡法和微陣列聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）等技術(shù)對(duì)收集的31個(gè)家系129例一級(jí)親屬進(jìn)行生化指標(biāo)、

5、自身抗體和HLAⅡ基因分型的相關(guān)檢測(cè)。
　　結(jié)果：一級(jí)親屬包括10例父母，65例同胞及54例子女。研究發(fā)現(xiàn)，31個(gè)PBC家系中1個(gè)家族患PBC，5個(gè)家系發(fā)現(xiàn)免疫異常。由此可見(jiàn)，PBC家系患病率為3.2％，免疫異常發(fā)生率為16.1％。
　　所有的一級(jí)親屬都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)慢性肝臟疾病，有7例一級(jí)親屬是在本次研究中才發(fā)現(xiàn)自身抗體異常，均為抗核抗體（antinuclear antibody,ANA）陽(yáng)性。其中，兩例一級(jí)親屬ANA滴度高達(dá)1

6、：320，一例為1：160，另外4例僅為1：40。然而在這些免疫異常的一級(jí)親屬中僅有一例患PBC，間接免疫熒光結(jié)果表現(xiàn)為AMA陽(yáng)性并且免疫印跡法測(cè)定ANA譜為AMA-M2型。
　　本實(shí)驗(yàn)除了觀察所有PBC患者及一級(jí)親屬的臨床表現(xiàn)外還對(duì)其肝功能進(jìn)行了檢查。研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)生免疫異常的5個(gè)家系一級(jí)親屬中2例出現(xiàn)肝功能異常，主要表現(xiàn)在天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase,AST），丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ala

7、nine aminotransferase,ALT）值異常。γ谷氨酰基轉(zhuǎn)肽酶（γ-glutamyl transpeptidase,GGT）和ALP均未見(jiàn)異常。而且同一個(gè)家系中三個(gè)姐妹同時(shí)發(fā)現(xiàn)肝功能異常。姐姐臨床表現(xiàn)為乏力且超聲表現(xiàn)為肝硬化，兩個(gè)妹妹無(wú)癥狀，因在本研究中檢測(cè)才發(fā)現(xiàn)自身抗體異常，尤其是其中一個(gè)妹妹特異性AMA-M2抗體陽(yáng)性，后來(lái)經(jīng)診斷為PBC。建議每天口服熊脫氧膽酸60mg，6個(gè)月后肝功能改善，疾病控制在無(wú)癥狀階段。

8、　　研究發(fā)現(xiàn)，在第一個(gè)家系的三個(gè)樣本中共同含有HLAⅡ-DRB1(*08,*12)基因型，第二個(gè)家系中包含HLAⅡ-DRB1(*08,*15)。第四個(gè)家系的成員含有一個(gè)共同HLAⅡ-DRB1(*12)基因，另有一個(gè)含有HLAⅡ-DRB1(*04,*07)基因。第三個(gè)家系其中一個(gè)成員含HLAⅡ-DRB1(*13)基因，還有一個(gè)含有HLAⅡ-DRB1(*07,*11)基因型。第三個(gè)家系和第四個(gè)家系都含有一個(gè)HLAⅡ-DRB1(*07)基因型