卡介苗干預(yù)對(duì)IL-17A在哮喘小鼠肺組織中表達(dá)的影響及可能機(jī)制.pdf

1、背景：支氣管哮喘是由多種炎性細(xì)胞和細(xì)胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病，以嗜酸性粒細(xì)胞浸潤為基本特征；但也有部分哮喘患者存在以中性粒細(xì)胞為主的氣道炎癥。已有多項(xiàng)研究證明在重度支氣管哮喘及糖皮質(zhì)激素依賴性、難治性支氣管哮喘患者的誘導(dǎo)痰及支氣管肺泡灌洗液(BALF)和黏膜組織中存在中性粒細(xì)胞增多現(xiàn)象。IL-17A對(duì)中性粒細(xì)胞有強(qiáng)大的化學(xué)趨化作用，可以顯著增加呼吸道內(nèi)中性粒細(xì)胞募集、活化而加重急性支氣管哮喘和慢性支氣管哮喘的急性發(fā)作。卡介苗(BC

2、G)作為結(jié)核桿菌的減毒活疫苗，具有很強(qiáng)的非特異性免疫刺激作用，能糾正Th1/Th2細(xì)胞因子平衡，使Th2型免疫反應(yīng)向Th1型免疫反應(yīng)逆轉(zhuǎn)，減輕氣道炎癥反應(yīng)。卡介苗干預(yù)是否能夠通過糾正Th1/Th2細(xì)胞因子平衡，上調(diào)Th1型免疫反應(yīng)增加IFN-γ而減少IL-17A在肺組織中的表達(dá)，減少對(duì)中性粒細(xì)胞的募集活化、減輕氣道炎癥反應(yīng)尚未見報(bào)道。
　　 目的：通過建立小鼠哮喘模型，給小鼠進(jìn)行預(yù)防性接種BCG，觀察BCG干預(yù)對(duì)IL-17A在哮

3、喘小鼠肺組織表達(dá)的影響，探討其可能的機(jī)制。
　　 方法：2月齡大小的24只雄性昆明小鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照（A組），哮喘組（B組），BCG干預(yù)組（C組）。通過卵清蛋白致敏建立哮喘模型。觀察3組小鼠的一般情況；肺泡灌洗液的細(xì)胞分類；肺組織的病理切片；運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)檢測(cè)肺組織勻漿中的IL-17A和IFN-γ水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.BALF檢查顯示：
　　 哮喘組（B組）與對(duì)照組（A組

4、）比較，BALF中白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞數(shù)均明顯升高(P＜0.01)。BCG干預(yù)組（C組）與哮喘組（B組）比較，BCG能明顯降低BALF中白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞比例(P＜0.01)。
　　 2.病理檢查顯示：
　　 病理學(xué)HE染色發(fā)現(xiàn)：對(duì)照組（A組）小鼠肺內(nèi)幾乎無炎性細(xì)胞浸潤；而哮喘組（B組）小鼠肺內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞和浸潤，其炎性細(xì)胞浸潤程度與對(duì)照組（A組）比較明顯增加(P＜0.01

5、)。BCG干預(yù)組（C組）干預(yù)后，炎性細(xì)胞浸潤程度較哮喘組（B組）明顯降低(P＜0.01)，但仍然比對(duì)照組（A組）嚴(yán)重(P＜0.01)。
　　 3.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果顯示：
　　 哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IFN-γ濃度顯著低于對(duì)照組（A組），哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IL-17A濃度顯著高于對(duì)照組（A組）（P均＜0.01）；BCG干預(yù)組（C組）小鼠肺組織勻漿中的IFN-γ濃度低于對(duì)照組（A組），肺組織勻漿中

6、的IL-17A濃度高于對(duì)照組（A組）（P均＜0.05），其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IFN-γ濃度低于BCG干預(yù)組（C組），其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IL-17A濃度高于BCG干預(yù)組（C組），其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4.相關(guān)分析顯示：
　　 哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IFN-γ濃度與氣道炎癥呈顯著負(fù)相關(guān)(r＝-0.956,P＜0

7、.01)，與肺泡灌洗液中性粒細(xì)胞數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān)(r＝-0.955,P＜0.01)；哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IL-17A濃度與氣道炎癥呈顯著正相關(guān)(r＝0.811,P＜0.05)，與肺泡灌洗液中性粒細(xì)胞數(shù)呈顯著正相關(guān)(r＝0.915,P＜0.01)；哮喘組（B組）小鼠肺組織勻漿中的IFN-γ濃度與肺組織勻漿中的IL-17A濃度呈顯著負(fù)相關(guān)(r＝-0.884,P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.在支氣管哮喘小鼠