卡介苗對(duì)哮喘小鼠肺組織中PPAR-γ表達(dá)的影響及意義.pdf

1、支氣管哮喘是一種氣道慢性炎癥性疾病，其疾病的發(fā)生發(fā)展由多種細(xì)胞包括氣道炎癥細(xì)胞、結(jié)構(gòu)細(xì)胞(如嗜酸粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和氣道上皮細(xì)胞等)和細(xì)胞組分參與。過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ，PPAR-γ)是一種核受體超家族中的轉(zhuǎn)錄因子，其配體包括類固醇、維生素D、甲狀腺激素、維甲酸受體等。以往的研究表明，PPAR-γ是調(diào)節(jié)脂肪

2、細(xì)胞分化和脂類代謝的重要受體。最近研究發(fā)現(xiàn)，PPAR-γ在炎性細(xì)胞、呼吸道上皮、支氣管黏膜下層、呼吸道平滑肌均有表達(dá)，具有抑制炎癥、誘導(dǎo)細(xì)胞分化、抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡等作用。PPAR-γ相關(guān)信號(hào)通路在急性肺損傷、慢性肺炎癥、肺動(dòng)脈高壓、肺纖維化中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。PPAR-γ激動(dòng)劑通過(guò)作用于嗜酸粒細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、肺上皮細(xì)胞等，能夠減輕過(guò)敏性哮喘小鼠呼吸道炎癥?？ń槊?BCG)是結(jié)核桿菌培養(yǎng)230代后得到的減毒活疫苗，主要用

3、于防治結(jié)核。眾多研究表明卡介苗在哮喘及變應(yīng)性疾病中起重要的免疫調(diào)節(jié)作用，能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生，Th1免疫反應(yīng)，上調(diào)Th1反應(yīng)，抑制Th2細(xì)胞功能，其機(jī)制可能與BCG誘導(dǎo)IFN-γ產(chǎn)生，降低IL-4、IL-5水平等相關(guān)。而卡介苗干預(yù)對(duì)PPAR-γ在哮喘小鼠肺組織表達(dá)產(chǎn)生影響及意義國(guó)內(nèi)外鮮見報(bào)道。
　　 目的：通過(guò)建立小鼠哮喘模型，給小鼠進(jìn)行治療性接種BCG，觀察BCG對(duì)哮喘小鼠肺組織中PPAR-γ表達(dá)的影響及可能的臨床意義。
　

4、　 方法：24只雄性昆明小鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組(A組)，哮喘模型組(B組)，BCG治療組(C組)。通過(guò)卵清蛋白致敏建立哮喘模型。觀察3組小鼠的一般情況；肺泡灌洗液的細(xì)胞分類；肺組織的病理切片；用RT-PCR和western blotting方法檢測(cè)肺組織中PPAR-γ mRNA和蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.BALF檢查顯示：
　　 哮喘模型組(B組)與正常對(duì)照組(A組)比較，BALF中白細(xì)胞總數(shù)、中性

5、粒細(xì)胞數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)和巨噬細(xì)胞數(shù)比例均明顯升高(P<0.01)。BCG治療組(C組)與哮喘模型組(B組)比較，BCG均能明顯降低BALF中白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)比例(P<0.05)。
　　 2.病理檢查顯示：
　　 病理學(xué)HE染色發(fā)現(xiàn)：正常對(duì)照組(A組)小鼠肺內(nèi)幾乎無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；而哮喘模型組(B組)小鼠肺內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，其炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度與正常對(duì)照組(A組)比較明顯

6、增加(P<0.01)。BCG接種后，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度較哮喘模型組(B組)明顯降低(P<0.05)。
　　 3.RT-PCR結(jié)果顯示：
　　 正常對(duì)照組(A組)小鼠肺組織中PPAR-γ mRNA高水平表達(dá)，哮喘模型誘導(dǎo)成功后，哮喘模型組(B組)小鼠肺組織中PPAR-γ mRNA表達(dá)水平顯著降低(P<0.01)，而BCG治療后，與哮喘模型組比較，BCG治療組(C組)小鼠肺組織中PPAR-γ mRNA表達(dá)水平明顯增加(P<0.

7、05)。
　　 4.Weatern blotting結(jié)果顯示：
　　 正常對(duì)照組(A組)小鼠肺組織中高表達(dá)PPAR-γ蛋白，哮喘模型誘導(dǎo)成功后，哮喘模型組(B組)小鼠肺組織中PPAR-γ蛋白表達(dá)水平顯著降低(P<0.01)，而BCG治療后，與哮喘模型組比較，BCG治療組(C組)小鼠肺組織中PPAR-γ蛋白表達(dá)水平明顯增加(P<0.05)。
　　 5.相關(guān)分析顯示：
　　 哮喘模型組(B組)小鼠肺泡灌洗液中

8、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)百分比與氣道炎癥呈顯著正相關(guān)(r=0.934，P<0.01)；哮喘模型組(B組)小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體PPAR-γ蛋白表達(dá)量與氣道炎癥呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.954，P<0.01)，與肺泡灌洗液中嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)百分比呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.900，P<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.在支氣管哮喘小鼠模型中，肺組織中PPAR-γ表達(dá)明顯降低，并與氣道炎癥呈負(fù)相關(guān)。
　　 2.BCG治療后