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文檔簡介
1、目的:檢測慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠肺組織中蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶6(PRMT6)和白介素-6(IL-6)、IL-13、環(huán)氧合酶-2(COX-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的mRNA的表達(dá)情況,及組蛋白H3R2非對稱雙甲基化(H3R2me2a)和組蛋白H3K4三甲基化(H3K4me3)信號水平情況,探討在COPD小鼠肺組織中PRMT6是否通過組蛋白的修飾來影響IL-6、IL-13、COX-2、MMP-2基因的表達(dá)。
2、 方法:經(jīng)腹腔注射香煙提取物(CSE)建立小鼠COPD模型,采用小動物肺功能儀檢測肺功能,小鼠肺組織病理學(xué)觀察肺氣腫變化,肺泡灌洗液總抗氧化能力測定及原位細(xì)胞凋亡情況檢測來共同鑒定小鼠COPD模型是否構(gòu)建成功。Western Blotting檢測小鼠肺組織中PRMT6蛋白表達(dá)情況及組蛋白H3R2me2a和H3K4me3信號水平。qRT-PCR檢測小鼠肺組織中PRMT6及IL-6、IL-13、COX-2、MMP-2的mRNA表達(dá)情況。
3、r> 結(jié)果:
(1)完成建模后,COPD組與對照組比較,小鼠氣道阻力(Raw)明顯增高(P<0.05),動態(tài)肺順應(yīng)性(Cdyn)、最大呼氣流量(PEF)和吸氣時(shí)間/呼氣時(shí)間(Ti/Te)的比值均明顯降低(P<0.05)。COPD組小鼠肺組織病理切片形態(tài)學(xué)觀察符合COPD病理改變,與對照組比較,平均內(nèi)襯間隔(MLI)和肺泡破壞指數(shù)(DI)都明顯增高(P<0.05),平均肺泡隔厚度(MAST)明顯降低(P<0.05)。肺泡灌洗液
4、(BALF)的總抗氧化能力比較,COPD組明顯低于對照組(P<0.05)。與對照組比較,COPD組小鼠肺組織間隔細(xì)胞凋亡率升高(P<0.05)。
(2)與對照組比較,COPD組小鼠肺組織中PRMT6蛋白表達(dá)下降(P<0.05),組蛋白H3R2me2a信號水平下降(P<0.05),而H3K4me3信號水平升高(P<0.05)。
(3)與對照組比較,COPD組小鼠肺組織中PRMT6mRNA表達(dá)降低(P<0.05),而IL
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