NDRG1基因在肺腺癌細(xì)胞及組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的研究NDRG1基因在肺腺癌中的表達(dá)及其在肺腺癌發(fā)生、發(fā)展中的意義。建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染含NDRG1的肺腺癌A549細(xì)胞株,探討NDRG1對A549細(xì)胞增殖與凋亡的影響及其可能的分子機(jī)制。
　　方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測20例正常肺組織和94例肺腺癌組織中NDRG1、P21及VEGF蛋白的表達(dá)情況,并分析三者與其臨床病理參數(shù)的相關(guān)性。運(yùn)用Spearman秩相關(guān)觀察三者蛋白表達(dá)的相關(guān)性。運(yùn)用Kaplan-Meier生存曲線分析其表達(dá)與患

2、者預(yù)后的關(guān)系。經(jīng)脂質(zhì)體介導(dǎo)將含有NDRG1重組表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人肺腺癌A549細(xì)胞株,采用G418篩選陽性細(xì)胞克隆及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白質(zhì)印跡鑒定;qRT-PCR和蛋白質(zhì)印跡檢測陽性細(xì)胞克隆P21及MDM2表達(dá);MTT比色法檢測穩(wěn)定高表達(dá)NDRG1的N11克隆的增殖活性;流式細(xì)胞儀檢測穩(wěn)定高表達(dá)NDRG1的N11克隆的凋亡率。
　　結(jié)果(1)在正常肺組織、肺腺癌組織中NDRG1陽性率分別為90.0％(18/20)

3、和51.2%(49/94),P21陽性率分別為80.0%(16/20)和33.0%(31/94),VEGF陽性率分別為20.0%(4/20)和53.2%(50/94),差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。肺腺癌組織中NDRG1、P21的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況呈負(fù)相關(guān),VEGF的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況呈正相關(guān)。NDRG1表達(dá)與P21表達(dá)呈正相關(guān),NDRG1和P21表達(dá)與VEGF表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)。單因素生存分析表明:NDRG1、P21和VEGF表達(dá)水平與生存顯

4、著相關(guān),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)成功建立高表達(dá)NDRG1的陽性A549細(xì)胞克隆(N11);N11細(xì)胞P21表達(dá)及細(xì)胞凋亡率顯著增高(P<0.05),而MDM2表達(dá)及細(xì)胞增殖顯著降低(P<0.05)。
　　結(jié)論(1)肺腺癌中NDRG1和P21表達(dá)下調(diào),而VEGF表達(dá)上調(diào),NDRG1和P21表達(dá)增加提示患者有較低的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率,NDRG1可能為一個(gè)新的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因,在肺腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮一定作用,NDRG1、P21和VEG