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文檔簡介
1、鄭州大學博士學位論文分化相關(guān)基因NDRG1在食管鱗癌的表達及誘導分化治療研究姓名:賀付成申請學位級別:博士專業(yè):病理學與病理生理學指導教師:張云漢李惠翔20060528鄭州大學2006年博士研究生論文分化相關(guān)基因NDRGl在食管鱗癌的表達及誘導分化治療研究劑,如Nicl。、Ni。s。、同型半胱氨酸、2B一巰基乙醇、農(nóng)霉素、溶血磷脂膽堿、銀毛酸、維甲酸類、維生素D、佛波酯等可均可調(diào)節(jié)NDRGlmRNA或蛋白質(zhì)的表達。由于NDRGl可被多種
2、分化調(diào)節(jié)劑誘導表達,使NDRGlmRNA或蛋白質(zhì)的表達上調(diào),因此,采用分化誘導劑誘導食管癌細胞,檢測NDRGl的表達及細胞增殖情況,有利于對食管癌誘導分化機制的探討。文獻檢索表明,有關(guān)NDRGl在食管鱗癌組織表達情況的研究,國外僅有l(wèi)篇文獻報道,國內(nèi)尚未見相關(guān)文獻報道,而用分化誘導荊全反式維甲酸(all—transretinoicacid,ATR^)、佛波酯(12一tetradecanoy卜phorbo卜13一acetate,TPA)、
3、l,25(oH)2VD3、丁酸鈉(sodiumbutyrate)等作用于人食管癌Ec9706細胞,檢測NDRGl基因表達的變化,國內(nèi)外均未見文獻報道。為系統(tǒng)地探討NDRGl在食管癌的表達情況,研究其與食管癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系,了解分化誘導劑ATRA、TPA等對人食管癌Ec9706細胞NDRGl表達的影響及NDRGl基兇表達在細胞增殖中的作用,本文采用免疫組化sP法、原位雜交和RT—PcR等技術(shù),檢測了49例高發(fā)區(qū)食管鱗癌組織、23例癌旁不
4、典型增生組織及49例正常粘膜中NDRGl的表達情況;采用免疫組化sP法、原位雜交、RT—PcR、細胞增殖抑制實驗岍T法和流式細胞技術(shù)等檢測了分化誘導劑ATRA、TPA等作用于人食管癌Ec9706細胞后,NDRGl基因表達、細胞增殖及細胞周期的變化;采用RNA干擾技術(shù),構(gòu)建pSuperneoGFPNDRGlsiRNA,并用脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)染入Ec9706細胞,觀察轉(zhuǎn)染后Ec9706細胞NDRGl基因表達及其與腫瘤生長、細胞增殖和細胞周期變化的
5、關(guān)系。在體外實驗的基礎(chǔ)上,本研究成功地構(gòu)建了裸鼠食管癌移植瘤動物模型,并采用維甲酸、佛波酯等分化誘導劑對移植瘤進行治療,分別觀察了移植瘤生長情況;抑制NDRGl基因表達后的轉(zhuǎn)染細胞移植瘤生長情況:并采用免疫組化技術(shù)檢測誘導分化荊治療后及RNAi后裸鼠移植瘤中NDRGl蛋白表達情況。通過以上實驗,試圖闡明NDRGl在食管癌的表達規(guī)律;探討NDRGl基因在腫瘤細胞誘導分化過程中的作用:研究Ec9706細胞NDRGl基因表達與腫瘤生長、細胞增
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